Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液

Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液使用說明書由上海遠(yuǎn)慕生化試劑廠家提供，本司是家老牌生化試劑供應(yīng)商，長期現(xiàn)貨供應(yīng)不同類的細(xì)胞裂解液，標(biāo)準(zhǔn)品，對照品，動物血清，化學(xué)試劑，培養(yǎng)基，抗體，抗原，多肽，酶類，生物分子，微生物，染色液，溶液，緩沖液，實驗耗材及其他試劑的，細(xì)胞裂解液部分展示：ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)，Gey's紅細(xì)胞裂解液(Gey's Lysis Buffer)，紅細(xì)胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)，Triton-NH4OH細(xì)胞裂解液，歡迎選購!

【信息說明】

產(chǎn)品名稱：Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液

規(guī)格：100ml/500ml

供應(yīng)商：遠(yuǎn)慕生化試劑廠家

分類：細(xì)胞組分分離

儲存條件：4℃,12個月

用途：Tris-NH4CL法溶解紅細(xì)胞,去除細(xì)胞懸液中的紅細(xì)胞

注意事項：無菌溶液；pH值為7.2。經(jīng)過濾除菌處理。

【自備材料】

1、胰蛋白酶

2、胎牛血清(FCS)

3、離心機

4、PBS、HBSS

5、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液

【操作步驟】

A、組織細(xì)胞樣本的常規(guī)操作

1、制備細(xì)胞懸液:新鮮組織經(jīng)過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過適當(dāng)方法制備成細(xì)胞懸液，離心棄上清。

2、裂解：加入3～5倍細(xì)胞沉淀體積的Tris-NH4ClLysisBuffer，輕柔吹打混勻，裂解1～2min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。

3、離心：4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清。如無低溫離心機，本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3各一次。

5、洗滌：根據(jù)具體實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃，400～500g離心2～3min，棄上清，離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上。

6、如有必要，重復(fù)上述步驟5一次，共洗滌1～2次。

7、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

B、組織細(xì)胞樣本的快速操作(無需洗滌)

1、制備細(xì)胞懸液：新鮮組織經(jīng)過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過適當(dāng)方法制備成細(xì)胞懸液，離心棄上清。

2、裂解：加入細(xì)胞5倍細(xì)胞沉淀體積的Tris-NH4ClLysisBuffer，輕柔吹打混勻，裂解1～2min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。

3、加入15～20ml的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻。

4、離心：4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清，本步驟亦可在室溫下操作。

5、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2～4各一次。

6、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

C、血液樣本的常規(guī)操作

1、取新鮮抗凝血，400～500g離心5min，離心棄上清。

2、裂解：:加入6～10倍細(xì)胞沉淀體積的Tris-NH4ClLysisBuffer，輕柔吹打混勻，裂解1～5min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。(特別提醒：對于鼠的血液，裂解1～2min已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至4～5min，并且裂解過程中輕輕搖動以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。)

3、離心：4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清。如無低溫離心機本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。

5、洗滌：根據(jù)具體實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃，400～500g離心3～5min，棄上清，離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上。

6、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

注意：對于微量或少量的血液樣本，可以不用第1步操作，可直接加入10倍血液體積的Tris-NH4ClLysisBuffer進(jìn)行第2步操作，并在4℃或室溫裂解4～15min。對于鼠的血液，裂解4～5min已經(jīng)足夠;對于人的外周血，宜延長裂解時間至10min，但通常不宜超過15min，并且裂解過程中宜適當(dāng)搖動以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。

D、血液樣本的快速操作(無需洗滌)

1、新鮮抗凝血中加入10倍體積的Tris-NH4ClLysisBuffer，輕輕吹打混勻，裂解4～15min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。(特別提醒：對于鼠的血液，裂解4～5min已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至10min，但通常不宜超過15min，并且裂解過程中宜適當(dāng)搖動以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。

2、加入20～30mlPBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻。

3、400～500g離心5min，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。

4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。

5、根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。
 

Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液

【注意事項】

1、制備細(xì)胞懸液是應(yīng)根據(jù)具體實驗需要，不一定要制備成單細(xì)胞懸液。

2、后續(xù)試驗如果是用于細(xì)胞培養(yǎng)，操作過程中應(yīng)注意無菌操作，盡量在超凈工作臺內(nèi)操作。

3、離心步驟盡量在4℃離心機上操作。

4、常規(guī)步驟與快速步驟的區(qū)別在于：常規(guī)步驟多了一步洗滌過程的離心，可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好，不需要大體積的離心管;快速步驟少了一次離心過程，洗滌效果略差一些，同時需要大體積的離心管。

5、離心洗滌后，通常極微量的紅細(xì)胞不會影響后續(xù)的檢測。

6、如果經(jīng)過Tris-NH4ClLysisBuffer處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取，在處理細(xì)胞時不必使用DEPC處理的溶液，即無需在該操作中特意去除RNase。

7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

【簡介說明】

Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液(Tris-NH4ClRedBloodCellLysisBuffer)，也稱為Tris-NH4ClLysisBuffer，是一種從人、鼠或其他哺乳動物等體內(nèi)的組織樣品或血液中裂解并去除無核紅細(xì)胞的溶液，其主要有效成分為氯化銨。Tris-NH4ClLysisBuffer經(jīng)過優(yōu)化配方，在裂解無核紅細(xì)胞的同時幾乎不損傷淋巴細(xì)胞(lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。對于裂解、去除有細(xì)胞核紅細(xì)胞，例如鳥或禽類的紅細(xì)胞，效果不佳，裂解類似細(xì)胞時，不建議采用。本裂解液經(jīng)過濾除菌，經(jīng)過Tris-NH4ClLysisBuffer處理過的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。

Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液相關(guān)產(chǎn)品

Triton-NH4OH細(xì)胞裂解液	紅細(xì)胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)
Gey's紅細(xì)胞裂解液(Gey's Lysis Buffer)	ACK紅細(xì)胞裂解液(ACK Lysis Buffer)

標(biāo)簽：Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液

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1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。

2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1-2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。

3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當(dāng)日價格為準(zhǔn)。

4、每日訂單截止時間為18點整，部分城市可到19點整，因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。

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