![雙[三(羥甲基)氨基甲烷],CAS:6976-37-0](http://struc.chem960.com/strucimg/7000/ctzw0nzi34oyob9fnlmhiwee.png)
上海遠慕生物專業(yè)供應G418溶液(geneticin,20mg/ml)，氨芐青霉素溶液(Ampicillin,50mg/ml)，氨芐青霉素溶液(Ampicillin,100mg/ml)，潮霉素B溶液(Hygromycin B,50mg/ml)，潮霉素B溶液(Hygromycin B,50mg/ml)等不系列抗生素產(chǎn)品，詳細介紹相關的用途，操作步驟，注意事項等詳情，本司現(xiàn)貨供應標準品對照品，動物血清血漿，細胞培養(yǎng)，抗體，培養(yǎng)基，化學試劑，生化試劑，染色液，緩沖液，液體試劑，按氨基酸，蛋白質(zhì)，酶，多肽，實驗耗材，進口試劑，國產(chǎn)試劑，其他實驗試劑等，品種滿足于科研實驗的需求，了解更多產(chǎn)品詳情請來電聯(lián)系我司銷售人員！
產(chǎn)品名稱：G418溶液(geneticin,20mg/ml)
規(guī)格：10ml
分類：抗生素
儲存條件：—20℃,避光,6個月
用途：又稱遺傳霉素,新霉素,對細菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳動物細胞具有氨基苷類毒性,對真核細胞進行篩選。
注意事項：無菌溶液。pH7.2-7.9,經(jīng),一般工作濃度為50-1000ug/ml。
儲存條件:—20℃,避光,6個月
主要成分：主要由G418、HEPES等組成，過濾除菌。
產(chǎn)品名稱：G418溶液(geneticin,20mg/ml)
規(guī)格：10ml
分類：抗生素
儲存條件：—20℃,避光,6個月
用途：又稱遺傳霉素,新霉素,對細菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳動物細胞具有氨基苷類毒性,對真核細胞進行篩選。
注意事項：無菌溶液。pH7.2-7.9,經(jīng),一般工作濃度為50-1000ug/ml。
儲存條件:—20℃,避光,6個月
主要成分：主要由G418、HEPES等組成，過濾除菌。
G418溶液(geneticin, G418)又稱遺傳霉素，是一種氨基糖苷類抗生素, 是細胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染最常用的抗性篩選試劑。G418能阻斷蛋白質(zhì)合成，對細菌、酵母、高等植物以及哺乳動物細胞均具有氨基糖苷類毒性，用于真核細胞從轉(zhuǎn)座子Tn5和Tn601穩(wěn)定轉(zhuǎn)染新霉素(neo)抗性基因的選擇和維持。經(jīng)常用于基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面。
遠慕生物G418溶液經(jīng)過濾除菌，一般工作濃度為50～1000ug/ml不等，然而不同類型的細胞需要根據(jù)實驗確定最佳濃度。在具有相對穩(wěn)定基因組的細胞(如CHO細胞)中，一旦篩選出穩(wěn)定細胞株后，無需加入G418繼續(xù)培養(yǎng)。
G418溶液(geneticin,20mg/ml)操作步驟（僅供參考）：
1.由于每種細胞對G418的敏感性不同，而且不同批次的G418的活性液不同，所以在篩選之前，需要確定G418的最佳篩選濃度，一般在50～1000μg/ml范圍內(nèi)進行篩選。
2.將細胞制備成細胞懸液，并稀釋到1000個/ml。
3.加入不同量的G418 solution (20mg/ml)，選擇在10~14天內(nèi)使細胞全部死亡的最低G418濃度來進行下一步的篩選試驗。
注意事項：
a.盡量減少反復凍融的次數(shù)，以免失效。
b.基因轉(zhuǎn)染到細胞內(nèi)要一段時間才能表達出蛋白質(zhì), 所以篩選不能太早。
c. 篩選也不宜太遲，一般要在轉(zhuǎn)染24h之后才開始加G418篩選。因為轉(zhuǎn)染了外源基因
的細胞代謝負荷較大，增值較慢，時間長了就會被沒有外源基因轉(zhuǎn)入的細胞所淹沒，最終導致篩選不出陽性克隆。
4. 隨著細胞代謝，G418的濃度和活性都會下降，應每3~5天更換一次含有G418的篩選液，這時藥物濃度可以降至200μg/ml。
5.加藥篩選約5～7天左右，細胞會大量死亡，為了減少死亡細胞對陽性克隆的不利影響以及增加陽性克隆的得到率，可以應用套環(huán)法或刮除法結合有限稀釋法來篩選陽性克隆。加藥后，在高倍鏡下，刮除陰性克隆，消化陽性克隆后繼續(xù)篩選培養(yǎng)?；蛘哂锰篆h(huán)套住陽性克隆，在套環(huán)內(nèi)加胰蛋白酶或EDTA消化，把消化液吸到另外一個新的孔中培養(yǎng)，最后再用有限稀釋法把陽性克隆在96孔板中篩選。
6. 一般經(jīng)過4周左右的篩選，得到的陽性克隆都比較穩(wěn)定。但是外源基因如果沒有整合到基因組中的話，目的基因還是很容易丟失的，再次篩選往往是必不可少的，經(jīng)過2次以上的篩選之后才能找到遺傳穩(wěn)定的細胞克隆。
7.盡量避免污染。
8.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
標簽：G418溶液(geneticin,20mg/ml)
遠慕生物G418溶液經(jīng)過濾除菌，一般工作濃度為50～1000ug/ml不等，然而不同類型的細胞需要根據(jù)實驗確定最佳濃度。在具有相對穩(wěn)定基因組的細胞(如CHO細胞)中，一旦篩選出穩(wěn)定細胞株后，無需加入G418繼續(xù)培養(yǎng)。
G418溶液(geneticin,20mg/ml)操作步驟（僅供參考）：
1.由于每種細胞對G418的敏感性不同，而且不同批次的G418的活性液不同，所以在篩選之前，需要確定G418的最佳篩選濃度，一般在50～1000μg/ml范圍內(nèi)進行篩選。
2.將細胞制備成細胞懸液，并稀釋到1000個/ml。
3.加入不同量的G418 solution (20mg/ml)，選擇在10~14天內(nèi)使細胞全部死亡的最低G418濃度來進行下一步的篩選試驗。
注意事項：
a.盡量減少反復凍融的次數(shù)，以免失效。
b.基因轉(zhuǎn)染到細胞內(nèi)要一段時間才能表達出蛋白質(zhì), 所以篩選不能太早。
c. 篩選也不宜太遲，一般要在轉(zhuǎn)染24h之后才開始加G418篩選。因為轉(zhuǎn)染了外源基因
的細胞代謝負荷較大，增值較慢，時間長了就會被沒有外源基因轉(zhuǎn)入的細胞所淹沒，最終導致篩選不出陽性克隆。
4. 隨著細胞代謝，G418的濃度和活性都會下降，應每3~5天更換一次含有G418的篩選液，這時藥物濃度可以降至200μg/ml。
5.加藥篩選約5～7天左右，細胞會大量死亡，為了減少死亡細胞對陽性克隆的不利影響以及增加陽性克隆的得到率，可以應用套環(huán)法或刮除法結合有限稀釋法來篩選陽性克隆。加藥后，在高倍鏡下，刮除陰性克隆，消化陽性克隆后繼續(xù)篩選培養(yǎng)?；蛘哂锰篆h(huán)套住陽性克隆，在套環(huán)內(nèi)加胰蛋白酶或EDTA消化，把消化液吸到另外一個新的孔中培養(yǎng)，最后再用有限稀釋法把陽性克隆在96孔板中篩選。
6. 一般經(jīng)過4周左右的篩選，得到的陽性克隆都比較穩(wěn)定。但是外源基因如果沒有整合到基因組中的話，目的基因還是很容易丟失的，再次篩選往往是必不可少的，經(jīng)過2次以上的篩選之后才能找到遺傳穩(wěn)定的細胞克隆。
7.盡量避免污染。
8.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
標簽：G418溶液(geneticin,20mg/ml)
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