Triton-NH4OH細(xì)胞裂解液

【Triton-NH4OH細(xì)胞裂解液】自備材料_簡(jiǎn)介信息

【信息說(shuō)明】

產(chǎn)品名稱：Triton-NH4OH細(xì)胞裂解液

規(guī)格：100ml/500ml

供應(yīng)商：遠(yuǎn)慕生化試劑廠家

分類：細(xì)胞組分分離

儲(chǔ)存條件：4℃,12個(gè)月

用途：裂解緩沖液

主要成分：無(wú)菌溶液。主要由0.5% Triton X-100、20mM NH4OH、PBS組成。

【自備材料】

1、胰蛋白酶

2、離心機(jī)

3、PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液

4、胎牛血清

【使用方法】

A、組織細(xì)胞樣本的常規(guī)操作

1、制備細(xì)胞懸液: 新鮮組織經(jīng)過(guò)胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過(guò)適當(dāng)方法制備成細(xì)胞懸液，離心棄上清。

2、裂解：加入3～5倍細(xì)胞沉淀體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。

3、離心： 4℃，離心5min，棄紅色上清。如無(wú)低溫離心機(jī)，本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3各一次。

5、洗滌：根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃，離心2～3min，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上。

6、如有必要，重復(fù)上述步驟5一次，共洗滌1～2次。

7、根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計(jì)數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

B、血液樣本的常規(guī)操作

1、取新鮮抗凝血，離心5min，棄上清。

2、 裂解：加入6～10倍細(xì)胞沉淀體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。

3、離心：4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清。如無(wú)低溫離心機(jī)，本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。

5、洗滌: 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃，離心2～3min，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液的量一般應(yīng)大于細(xì)胞沉淀體積的5倍以上。

6、根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計(jì)數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

注意： 對(duì)于微量或少量的血液樣本，可以不用第1步操作，可直接加入10倍血液體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer進(jìn)行第2步操作，并在4℃或室溫裂解4～15min。

Triton-NH4OH細(xì)胞裂解液

【注意事項(xiàng)】

1、制備細(xì)胞懸液時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，不一定要制備成單細(xì)胞懸液。

2、后續(xù)試驗(yàn)如果是用于細(xì)胞培養(yǎng)，操作過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作，盡量在超凈工作臺(tái)內(nèi)操作。

3、離心步驟盡量在4℃離心機(jī)上操作。

4、常規(guī)步驟與快速步驟的區(qū)別在于：常規(guī)步驟多了一步洗滌過(guò)程的離心，可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好，不需要大體積的離心管;快速步驟少了一次離心過(guò)程，洗滌效果略差一些，同時(shí)需要大體積的離心管。

5、離心洗滌后，通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè)。

6、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

【簡(jiǎn)介說(shuō)明】

在生物科研領(lǐng)域，經(jīng)常需要去除紅細(xì)胞，去除紅細(xì)胞的方法有多種，如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Leagene Triton-NH4OH細(xì)胞裂解液(Triton-NH4OH Lysis Buffer)經(jīng)過(guò)優(yōu)化配方，在裂解無(wú)核紅細(xì)胞的同時(shí)幾乎不損傷淋巴細(xì)胞(Lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。本裂解液經(jīng)過(guò)濾除菌，經(jīng)過(guò)Triton-NH4OH Lysis Buffer處理過(guò)的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測(cè)。

標(biāo)簽：Triton-NH4OH細(xì)胞裂解液

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產(chǎn)品介紹，技術(shù)疑難解答

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1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。

2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1-2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。

3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日價(jià)格為準(zhǔn)。

4、每日訂單截止時(shí)間為18點(diǎn)整，部分城市可到19點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。

5、請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、電話等以傳真、EMail、電話等形式通知我們。