紅細(xì)胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)

【紅細(xì)胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)】信息簡(jiǎn)介

【信息說(shuō)明】

產(chǎn)品名稱：紅細(xì)胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)

規(guī)格：100ml/500ml

供應(yīng)商：遠(yuǎn)慕生化試劑廠家

分類：細(xì)胞組分分離

儲(chǔ)存條件：4℃,12個(gè)月

用途：去除細(xì)胞懸液中的紅細(xì)胞,屬于溶解紅細(xì)胞方法的一種

主要成分：無(wú)菌溶液；主要由10mM PBS、氯化鈉、氯化鉀等組成。經(jīng)高壓滅菌處理。

【操作步驟】

注意：絕大多數(shù)情況下，應(yīng)使用無(wú)菌去離子水稀釋RBC Lysis Buffer(10×)至1×使用，流式細(xì)胞術(shù)除外。

A、組織細(xì)胞樣本的常規(guī)操作

1、制備細(xì)胞懸液: 新鮮組織經(jīng)過(guò)胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過(guò)適當(dāng)方法制備成細(xì)胞懸液，離心棄上清。

2、裂解: 加入1×RBC Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解1～2min。 3、離心，棄紅色上清。本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3各一次。

5、洗滌：根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃離心，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。

B、組織細(xì)胞樣本的快速操作(無(wú)需洗滌)

1、制備細(xì)胞懸液：新鮮組織經(jīng)胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，制備細(xì)胞懸液，離心棄上清。

2、裂解：加入細(xì)胞5倍細(xì)胞沉淀體積的1×RBC Lysis Buffer，輕柔吹打混勻裂解。

3、加入PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液，輕柔混勻。

4、離心5min，棄紅色上清，本離心步驟亦可在室溫下操作。

5、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2～4各一次。

6、根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計(jì)數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

C、血液樣本的常規(guī)操作

1、取新鮮抗凝血，離心，棄上清。

2、 裂解：加入1×RBC Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解1～5min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。

3、離心：棄紅色上清。本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。

5、洗滌： 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀；4℃離心，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。

6、根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計(jì)數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

D、血液樣本的快速操作(無(wú)需洗滌)

1、新鮮抗凝血中加入10倍體積的1×RBC Lysis Buffer，輕輕吹打混勻，裂解4～15min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。

2、加入 PBS、HBSS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液，輕柔混勻。

3、離心，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。

4、如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。

5、根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計(jì)數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

紅細(xì)胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)

【注意事項(xiàng)】

1、制備細(xì)胞懸液時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，不一定要制備成單細(xì)胞懸液。

2、后續(xù)試驗(yàn)如果是用于細(xì)胞培養(yǎng)，操作過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作，盡量在超凈工作臺(tái)內(nèi)操作。

3、離心步驟盡量在4℃離心機(jī)上操作。

4、常規(guī)步驟與快速步驟的區(qū)別在于：常規(guī)步驟多了一步洗滌過(guò)程的離心，可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好，不需要大體積的離心管;快速步驟少了一次離心過(guò)程，洗滌效果略差一些，同時(shí)需要大體積的離心管。

5、離心洗滌后，通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè)。

6、如果經(jīng)過(guò)1×RBC Lysis Buffer處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取，在處理細(xì)胞時(shí)不必使用DEPC處理的溶液，即無(wú)需在該操作中特意去除RNase。

7、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

【簡(jiǎn)介說(shuō)明】

去除紅細(xì)胞的方法有多種，如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。紅細(xì)胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一種從人、鼠或其他哺乳動(dòng)物等體內(nèi)的組織樣品或血液中裂解并去除無(wú)核紅細(xì)胞的溶液，其主要有效成分為NH4Cl。 RBC Lysis Buffer(10×)配方經(jīng)過(guò)優(yōu)化不同于ACK Lysis Buffer，在裂解無(wú)核紅細(xì)胞的同時(shí)幾乎不損傷淋巴細(xì)胞(Lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。該裂解液經(jīng)過(guò)濾除菌，為10×的濃縮液，使用1×RBC Lysis Buffer處理過(guò)的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測(cè)，尤其適用于流式細(xì)胞檢測(cè)或需要高濃度裂解液的情況。

標(biāo)簽：紅細(xì)胞裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)

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產(chǎn)品介紹，技術(shù)疑難解答

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1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。

2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1-2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。

3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日價(jià)格為準(zhǔn)。

4、每日訂單截止時(shí)間為18點(diǎn)整，部分城市可到19點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。

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