pPha-T1質(zhì)粒

產(chǎn)品名稱：pPha-T1質(zhì)粒
供應商：遠慕生物
規(guī)格：0.5-2ug
質(zhì)粒分類:其他宿主載體



pPha-T1質(zhì)粒 使用說明：
1、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min，再加入20μl無菌水溶解質(zhì)粒，室溫放置1min；
2、從-80℃冰箱中取出相應的感受態(tài)，置于冰盒上解凍，并做好標記；
3、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴30min；
4、42℃熱激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min；
6、6000rpm離心5min，僅留100ul上清混勻菌體沉淀；
7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上，倒入適量玻璃珠，涂勻液體；
8、將平板正向培養(yǎng)1h，再倒置培養(yǎng)12h~16h；
9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12h~16h，根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒。


pPha-T1質(zhì)粒注意事項：
1、如果您收到的是甘油菌種，請先四區(qū)劃線，挑取單克隆培養(yǎng)。
2、如果第二天轉(zhuǎn)化平板長的過多，請將質(zhì)粒按比例稀釋后再轉(zhuǎn)化。