動物血清的區(qū)分比較與作用
2023-07-12 9:38 來源:上海遠慕生物試劑
血清主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。由于血清來源于動物,且含有細胞培養(yǎng)中所需的各種營養(yǎng)(血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等),這奠定了血清是細胞培養(yǎng)實驗中最普遍的試劑的基礎。
市面上的牛血清產(chǎn)品名稱雖然五花八門,但根據(jù)其不同的特性,追其根本,但大致可分為以下四種。
根據(jù)牛的取血年齡可以區(qū)分:
胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS)
指的是取自未出生,母牛剖腹心臟穿刺采血得來的血清。
國產(chǎn)胎牛血清(并無明確定義,但通常用此命名)
指的是出生4-6小時,且未進行哺乳(unsuckled)進食的新生牛,有時還稱作國產(chǎn)新生牛血清。 適用于常規(guī)細胞培養(yǎng)、細胞株保存和單抗研制等方面。
新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS,或稱小牛血清)
指的是出生14天-3個月進行取血的牛血清。適用于培養(yǎng)或?qū)Νh(huán)境要求低的細胞。
成年牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS)
指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛血清。適用于多種動物體外培養(yǎng),包括:克隆細胞、單層細胞、懸浮細胞等。
以上取血牛齡的差異主要是受當?shù)貒倚竽翗I(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響,因為牛血多為畜牧業(yè)副產(chǎn)業(yè),并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。
幾種血清的比較:
提取血清體積/只牛: 成年牛血清(5-8L) > 小牛血清 (2L) > 國產(chǎn)胎牛血清 (1L) > 胎牛血清 (0.5L)
培養(yǎng)細胞的效果: 胎牛血清 > 國產(chǎn)胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清
價格:胎牛血清 > 國產(chǎn)胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清
這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來說,年齡越小的牛血清,細胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛,且因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低。故目前多數(shù)實驗人員選擇的都是胎牛血清進行細胞培養(yǎng)。
胎牛血清根據(jù)實驗要求的不同又進行了特殊加工工藝加工,那么在這么多種類的血清面前,要怎么選擇適合自己細胞培養(yǎng)的那一款呢?
根據(jù)加工工藝的不同進行區(qū)分:
去外泌體血清
去除≥99%的胎牛血清內(nèi)源外泌體,并與處理前的胎牛血清具有相同的細胞生長速率和形態(tài)。適用于收集細胞分泌的外泌體時使用。
透析血清
分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標定特定成分進行研究的實驗中。
碳吸附血清
使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì),如某些激素、細胞因子、生長因子等,去除作用對分子量大小并無區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗證激素的作用效果。
低IgG血清
用于研究抗體、病毒和病毒反應、細胞表面抗原表位。
四環(huán)素調(diào)控胎牛血清
應用于使用敏感四環(huán)素誘導表達系統(tǒng)的細胞培養(yǎng)(Tet-on, Tet-off),以及其它對四環(huán)素敏感的實驗中。
HI (熱滅活)處理血清
血清熱滅活是通過提高血清溫度到56℃,并保持該溫度30Min完成, 可以去除血清內(nèi)補體,確保細胞與抗體結(jié)合不會發(fā)生裂解。加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究中培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
胚胎干細胞(ES)專用血清
是從多個批次的胎牛血清經(jīng)過細胞培養(yǎng)及其他測試篩選出特定批號,適用于人及小鼠胚胎干細胞、成體干細胞及原代細胞長期培養(yǎng)。
間充質(zhì)干細胞(MSC)專用血清
從多個批次的胎牛血清篩選出特定批號,經(jīng)過骨髓,脂肪組織及臍帶來源的間充質(zhì)干細胞的細胞活性嚴格測試,通過傳代及分化比例測試。
根據(jù)血清來源物種進行區(qū)分:
馬血清
10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應答, 常與牛血清結(jié)合或單獨作為哺乳動物細胞培養(yǎng)的補充培養(yǎng)基。
豬血清
豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細胞培養(yǎng), 疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體), 中和脂質(zhì)體包裹的腺相關病毒(AAV), 用于誘導大鼠肝纖維化, 作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)中的標準陰性參考。
兔血清
正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學和免疫細胞化學方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。
羊血清
用于生物醫(yī)學研究的大多數(shù)細胞系和原代培養(yǎng)物上,FBS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學研究。
用作魚類細胞培養(yǎng)的有效NBCS替代物。
可成功地代替胎牛血清在生長培養(yǎng)基中長期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。
雞血清
適用于單抗研制、規(guī)?;囵B(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學研究和診斷試劑生產(chǎn)。
驢血清
適用于單抗研制、免疫組化、規(guī)模化培養(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學研究和診斷試劑生產(chǎn)。
小鼠血清
小鼠血清采用健康小鼠血液為原料,經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成,性狀為澄清液體,無噬菌體、低內(nèi)毒素,無溶血無異物無細菌真菌支原體霉形體衣原體等,適用于試驗室或生化科研相關試驗,滿足不同科研實驗的多種需求。
遠慕生物長期供應各類動物血清:
①動物血清系列:
胎牛血清,特級新生牛血清,優(yōu)級新生牛血清,標準新生牛血清,標準馬血清,特級馬血清,山羊血清,綿羊血清,兔血清,雞血清,豬血清,大牛血清,小牛血清,狗血清,驢血清,大鼠血清,小鼠血清,豚鼠血清,巴比西鼠血清。
②血漿系列:
胎牛血漿,新生牛血漿,大牛血漿,小牛血漿,兔血漿,馬血漿,山羊血漿,綿羊血漿,雞血漿,豬血漿,狗血漿,驢血漿,大鼠血漿,小鼠血漿,豚鼠血漿。
③脫纖維全血系列(玻璃瓶和Pet塑料瓶):
新生牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血,兔血,兔紅細胞(20%),綿羊紅細胞(20%),雞紅細胞(20%),兔紅細胞(4%),綿羊紅細胞4%,雞紅細胞(4%)。
④抗凝全血系列:
新生牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血
⑤裂解全血(脫纖維裂解,抗凝裂解)
脫纖維裂解血:小牛血,大牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血
抗凝裂解血:小牛血,大牛血,山羊血,綿羊血,馬血,驢血