血清污染和過濾的相關(guān)問題解答

1、問：懷疑購買的Gibco胚胎干細胞專用胎牛血清（Gibco ES專用胎牛血清）染菌，想用濾膜過濾一下，可否自己用0.22μm濾膜過濾？對血清性質(zhì)有多大影響？有做過的么？

答：可以過濾的，血清當出廠時都是0.22μm或0.1μm過濾除菌。想證明有沒有染菌不用過濾這么麻煩，只要放置于37℃過夜就可以了，如果有微生物污染會變渾濁的，如果還是澄清的就說明沒有問題的。實驗室中血清很難直接過濾，一般要加到培養(yǎng)基中再過濾。我們實驗室制備培養(yǎng)基時，都使用濾膜過濾，一般而言如果制備1-2瓶培養(yǎng)基，一個濾膜及一支30ml注射器可以過濾50ml小牛血清。如果大量制備培養(yǎng)基也可以將血清加到培養(yǎng)基中，使用0.22微米的大濾膜一起過濾。

2、問：我懷疑我用的完全1640培養(yǎng)液被污染了，準備重新過濾消毒，過濾后是否需要補充胎牛血清？如需又如何補充？

答：完全1640培養(yǎng)液被污染了，如果是支原體的話，過濾沒有作用，支原體可以通過濾膜。我們用1640液，都是配液后保留500ml，然后其他的分裝100-200ml，現(xiàn)用現(xiàn)配因為血清比1640要貴，如果你想過濾的話，建議你加原比例血清，因為Gibco牛血清不會很容易通過濾膜。最主要的還是找到可能污染的原因。
3、問：加好了Gibco牛血清雙抗的培養(yǎng)基由于污染了再過濾后還能用嗎？

答：建議不要用了。在加了雙抗的情況下已經(jīng)污染，那么細菌污染的可能性會較小了。一般的過濾除不能去除病毒或者部分真菌的污染的。

4、問：我準備把使用的完全1640培養(yǎng)液重新過濾一遍，不知道培養(yǎng)液中的血清成分是否能通過濾膜，過濾后是否還需要補充胎牛血清？如需又如何補充？

答：可以透過，但是隨著液體量的增多會很慢，如果不加壓會比較麻煩，還有最好用低蛋白吸附的，不然損失是比較大的。