【葡萄糖-6-磷酸酶染色液(鉛法)使用說明
【信息說明】
產(chǎn)品名稱:葡萄糖-6-磷酸酶染色液(鉛法)
供應商:遠慕生化試劑廠家
規(guī)格:3×50ml
分類:酶類染色
儲存條件:4℃,避光,6個月
用途:葡萄糖-6-磷酸酶
注意事項:主要由孵育液、硝酸鈷、硫化銨、等組成。酶活性部位呈棕色沉淀。
【操作步驟】
1、冰凍切片入蒸餾水清洗。
2、入G-6-Pase孵育液37℃孵育。
3、自來水沖洗后,蒸餾水沖洗。
4、在上述過程中配制ALP硫化工作液,即取試劑(B)用蒸餾水稀釋50倍, 即為ALP硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液孵育。
5、自來水水洗。
6、(可選)入中性福爾馬林固定。
7、入蒸餾水水洗2次。
8、甘油明膠封片。
9、染色結(jié)果:G-6-Pase活性處為棕色沉淀
【注意事項】
1、ALP硫化液易失效,最好分成小分儲存,一經(jīng)開啟立即使用。
2、ALP硫化液具有腐蝕性和刺激性氣味,應小心操作。
3、對冰凍切片染色時,應減少切片在室溫暴露的時間。
4、葡萄糖-6-磷酸酶染色液(鉛法)適用于冰凍切片,一般不固定,也可染色后固定,固定步驟非必須步驟。
【簡介說明】
葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6 –phosphatase,G-6-Pase)是一種多存在于哺乳類動物肝、腎、腸等組織的膜結(jié)合酶,G-6-Pase和微體緊密結(jié)合,定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng),是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的主要標志酶,能把葡萄糖-6-磷酸水解成葡萄糖和磷酸。葡萄糖-6-磷酸酶染色液(鉛法)采用重金屬捕捉劑和磷酸結(jié)合顯示酶的活性。該酶對固定很敏感,組織經(jīng)80%乙酸溶液固定后用石蠟包埋,G-6-Pase完全被抑制。
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