肥大細(xì)胞染色液(甲苯胺藍(lán)法)

肥大細(xì)胞染色液(甲苯胺藍(lán)法)操作步驟：
1.取新鮮組織立即固定于10%中性福爾馬林固定液中，常規(guī)脫水包埋；
2.切片厚度4-5μm，常規(guī)脫蠟至水；
3.系列乙醇，自來水洗；
4.入ToluidineBlueOStain，浸染1；
5.自來水稍洗；
6.TBO分化液分化，直至細(xì)胞核和顆粒清晰，可在顯微鏡下控制；
7.自來水稍洗，濾紙吸干或吹風(fēng)機(jī)吹干水分；
8.95%乙醇，無水乙醇，每次；
9.二甲苯透明，中性樹膠封固。

肥大細(xì)胞染色液(甲苯胺藍(lán)法)說明：
1.肥大細(xì)胞(Mastcell)是疏松結(jié)締組織內(nèi)常見的細(xì)胞，常成群的沿著小血管和淋巴管分布，也常見于支氣管和胰腺的小葉間導(dǎo)管周圍，一般細(xì)胞較大，直徑約為20-30μm，呈圓形或橢圓形，胞核較小、胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大且具有異染性嗜酸性顆粒。
2.甲苯胺藍(lán)(ToluidineBlueO)中的陽離子有染色作用,組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)還含有兩個助色團(tuán)，能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類,幫助發(fā)色團(tuán)對組織產(chǎn)生染色力,使切片上的組織細(xì)胞著色，可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色。肥大細(xì)胞顆粒呈紫紅色，其他呈藍(lán)色。

肥大細(xì)胞染色液(甲苯胺藍(lán)法)注意事項：
1.針對于胃粘膜組織、軟骨組織等較難著色組織的染色，浸染于甲苯胺藍(lán)染色液的時間應(yīng)相應(yīng)延長；
2.應(yīng)注意組織要新鮮，取出后立即固定；
3.甲苯胺藍(lán)染色后不宜采用低濃度乙醇脫水，否則容易導(dǎo)致褪色；
4.分色后應(yīng)快速入95%乙醇，無水乙醇，二甲苯的時間不宜過久，否則容易導(dǎo)致褪色；
5.染色程度可通過改變?nèi)旧珪r間或染色溫度做適當(dāng)調(diào)整；
6.每次試劑用完后，請迅速蓋好，以免揮發(fā)；
7.石炭酸對皮膚、粘膜有強(qiáng)列刺激性和腐蝕性，使用時請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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