稱肌球蛋白重鏈抗體

稱肌球蛋白重鏈抗體保存方法：

抗體保存得當(dāng)與否直接決定了抗體的活性和使用效果；如果抗體保存得當(dāng)，大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年；請(qǐng)按照說(shuō)明書或者抗體標(biāo)簽上推薦的保存條件正確保存抗體!無(wú)論是保存還是運(yùn)輸，絕對(duì)避免反復(fù)凍融抗體!
1、拿到抗體后請(qǐng)務(wù)必在1000-3000轉(zhuǎn)離心1-2分鐘后再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存!(由于運(yùn)輸過(guò)程中反復(fù)顛簸，管內(nèi)微量抗體容易聚集在管蓋處，一旦直接打開(kāi)容易流失抗體。請(qǐng)放心抗體出廠時(shí)保證已裝入足量。)
2、對(duì)于大部分抗體，比較合適的保存方式是分裝后保存在-20℃冰箱；分裝可以最大程度降低反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害，同時(shí)也降低了多次從同一管中吸取抗體造成污染的可能性；分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好，但建議最少不要少于10μL每份；分裝體積越小，抗體濃度可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響，同時(shí)分裝次數(shù)越多移液吸頭吸附的抗體也越多，可能會(huì)誤認(rèn)為抗體沒(méi)有足量裝入；(最好用無(wú)菌的進(jìn)口0.2ML離心管來(lái)分裝抗體，國(guó)產(chǎn)的小管一般沒(méi)有經(jīng)過(guò)很好的硅化處理，容易吸附抗體蛋白，影響抗體活性。)分裝時(shí)請(qǐng)將無(wú)菌的微量移液器吸頭先插入管底部反復(fù)吹打幾次后再吸出抗體，以便抗體有效成分與抗體保護(hù)劑充分混勻；復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完，請(qǐng)將剩余母液保存在4℃冰箱，避免再凍起來(lái)!絕對(duì)避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱的冷藏室中。盡量將抗體保存在手動(dòng)除霜冰箱里面，而不是在冰箱門上。
3、大部分抗體收到后4℃短暫保存1-2周對(duì)抗體活性是基本沒(méi)有影響的；如果抗體很快(1-2周內(nèi))就能使用完，推薦在4℃保存，避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害；如果要長(zhǎng)期保存則分裝后-20℃保存。
4、特殊抗體的保存：酶偶聯(lián)抗體不應(yīng)凍存，而應(yīng)保存于4℃；凍融不僅影響抗體結(jié)合能力，還會(huì)降低酶活性；無(wú)論偶聯(lián)至熒光染料，酶還是生物素，偶聯(lián)抗體都應(yīng)保存于深色試劑瓶中或用金屬箔包裹；暴露于光線中將損害偶聯(lián)物的活性；特別是熒光偶聯(lián)物易受到光漂白影響，在實(shí)驗(yàn)的所有階段都應(yīng)避光。
 

稱肌球蛋白重鏈抗體鑒定方法：

1、抗體的效價(jià)鑒定：不管是用于診斷還是用于治療，制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)；不同的抗原制備的抗體，要求的效價(jià)不一；鑒定效價(jià)的方法很多，包括有試管凝集反應(yīng)，瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等；常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法，以資比較；如制備抗抗體的效價(jià)，一般就采用瓊脂擴(kuò)散 試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2、抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力；抗體的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)；衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示；交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定；以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線，計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在ic50時(shí)的濃度，并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
3、親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度；親和力的高低是由抗原分子的大小，抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的；有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵，疏水鍵，側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力，范德華力和空間斥力；親和力常以親和常數(shù)k表示,k的單位是l/mol；抗體親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途，驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。