精子細(xì)胞BWW培養(yǎng)基儲(chǔ)存液

精子細(xì)胞BWW培養(yǎng)基儲(chǔ)存液的滅菌方法，產(chǎn)品用途，特點(diǎn)，說(shuō)明書(shū)，操作步驟，注意事項(xiàng)，規(guī)格等咨訊由上海遠(yuǎn)慕生物提供介紹，本司專(zhuān)業(yè)供應(yīng)不同系列的培養(yǎng)基，抗體，動(dòng)物血清血漿，標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品，抗原，細(xì)胞培養(yǎng)，蛋白質(zhì)，化學(xué)試劑，生化試劑，維生素，氨基酸，生物分子，微生物，實(shí)驗(yàn)耗材，染色液，緩沖液，溶液，其他實(shí)驗(yàn)試劑等，品種齊全，為滿(mǎn)足于客戶(hù)的需求，我們的產(chǎn)品推出了進(jìn)口系列及國(guó)產(chǎn)系列，歡迎來(lái)電洽談！

中文名：精子細(xì)胞BWW培養(yǎng)基儲(chǔ)存液
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格：500ml
分類(lèi)：培養(yǎng)基
保存：4℃,12個(gè)月
系列：精子細(xì)胞BWW培養(yǎng)基
說(shuō)明：無(wú)菌溶液。經(jīng)過(guò)濾除菌處理。
組成：由氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、硫酸鎂、酚紅等組成，不含葡萄糖、丙酮酸鈉、BSA等以及抗生素。
用途：本品是一種旨在用于廣譜動(dòng)物和人體精子細(xì)胞獲能處理的常用營(yíng)養(yǎng)液。

精子細(xì)胞BWW培養(yǎng)基儲(chǔ)存液操作步驟及注意事項(xiàng)： 
A、操作步驟：
1、 取干凈的精液樣本室溫放置，使之充分液化。
2、 制備精子細(xì)胞(僅供參考，不是必須步驟)：
a、上泳法：取一個(gè)無(wú)菌的15ml錐底離心管，加入1ml液化的精液，在其上方輕輕加入Earle培養(yǎng)液，45°傾斜試管。輕輕豎立試管，取出最上層的1ml液體。加入8ml增補(bǔ)的Earle培養(yǎng)液稀釋?zhuān)瑮壣锨濉＜尤隕arle培養(yǎng)液0.5ml重新懸浮細(xì)胞，用于精子密度或功能的評(píng)估。
b、非連續(xù)密度梯度法：取一個(gè)無(wú)菌的錐底離心管，加入Percoll。輕輕加入3ml 40%的Percoll于Percoll液面上，小心操作，不要打亂兩種液體的界面。輕輕加入1-2ml精液于梯度溶液上，棄上清。將管底的精子團(tuán)重新懸浮于的Earle培養(yǎng)液中，離心，棄上清。加入1mlEarle培養(yǎng)液，重新懸浮。
3、 將含有精子細(xì)胞的離心管置于37℃含5%CO2、95%空氣的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育。如無(wú)上 述培養(yǎng)箱，可將離心管密封加蓋，置于37℃的普通培養(yǎng)箱內(nèi)孵育。在孵育過(guò)程中，大多數(shù)活動(dòng)的精子從精漿中游離到覆蓋上面的培養(yǎng)液內(nèi)。
4、 離心精子懸液，使精子細(xì)胞密度接近于10×106/ml，將精子重懸于精子細(xì)胞BWW培 養(yǎng)基中，并在37℃含5%CO2、95%空氣的細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育。如無(wú)上述培養(yǎng)箱，可將離心管密封加蓋，置于37℃的普通培養(yǎng)箱內(nèi)孵育。在孵育過(guò)程中，將試管20°傾斜。

B、注意事項(xiàng)：
1、 注意無(wú)菌操作，盡量避免污染。
2、 如無(wú)Earle培養(yǎng)液和增補(bǔ)的Earle培養(yǎng)液，可用精子細(xì)胞BWW培養(yǎng)基代替。
3、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
4、操作過(guò)程中，請(qǐng)遵循說(shuō)明書(shū)操作。

精子細(xì)胞BWW培養(yǎng)基儲(chǔ)存液滅菌方法及保存方法：
A、滅菌方法：
1、高壓蒸汽滅菌：
a、高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在愛(ài)制備過(guò)程中混入各種雜菌，分裝后應(yīng)立即滅菌，至少應(yīng)在24h內(nèi)完成滅菌工作。
b、滅菌時(shí)一般是在0.105MPa壓力下，溫度121℃時(shí)，滅菌15~30min即可。消毒時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，也不能超過(guò)規(guī)定的壓力范圍，否則有機(jī)物質(zhì)特別是維生素類(lèi)物質(zhì)就會(huì)在高溫下分解，失去營(yíng)養(yǎng)作用，也會(huì)使培養(yǎng)基變質(zhì)、變色，甚至難以凝固。
c、將蒸餾水或自來(lái)水裝在三角瓶中，裝水量一般不超過(guò)瓶的2/3，用牛皮紙或硫酸紙包扎封口，然后放入高壓鍋中滅菌后即為無(wú)菌水。
d、滅菌后的培養(yǎng)基可放到培養(yǎng)室中預(yù)培養(yǎng)3d，若無(wú)污染現(xiàn)象，則證明滅菌是徹底的，可以使用。暫時(shí)不用的培養(yǎng)基最好置于10℃下保存。
e、含IAA或GA3的培養(yǎng)基應(yīng)在1周內(nèi)用完，其他培養(yǎng)基最多也不要超過(guò)1個(gè)月。
2、過(guò)濾滅菌：
a、一些植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及有機(jī)物，如IAA、GA3、ZT、CM等，遇熱容易分解，不能與培養(yǎng)基一起進(jìn)行高溫滅菌，而要使用細(xì)菌過(guò)濾器濾去其中的雜菌。
b、細(xì)菌過(guò)濾器與濾膜（孔徑0.45微米）使用之前要先進(jìn)行高壓滅菌。過(guò)濾后的溶液要立即加入培養(yǎng)基中，若為液體培養(yǎng)基，可在培養(yǎng)基冷卻至30℃時(shí)加入；若為固體培養(yǎng)基，必須在培養(yǎng)基凝固之前（50-60℃）加入，振蕩使溶液與其他成分混合均勻。