液體細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作步驟
2023-06-05 10:12 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
以光合細(xì)菌培養(yǎng)方法為例
光合細(xì)菌培養(yǎng)的方法,按次序分為容器、工具的消毒,培養(yǎng)基的制備,接種和培養(yǎng)管理四個(gè)步驟。
(一)容器、工具的消毒參考、此處從略。
(二)培養(yǎng)基的制備
1.培養(yǎng)用水
如果培養(yǎng)的光合細(xì)菌是淡水種,菌種培養(yǎng)可用蒸餾水,生產(chǎn)培養(yǎng)可用消毒的自來水(或井水)配制。如果培養(yǎng)的光合細(xì)菌是海水種,則用天然海水配制培養(yǎng)基,注意在海水中加入磷元素時(shí),不能用磷酸氫二鉀,應(yīng)用磷酸二氫鉀,不然會(huì)產(chǎn)生大量沉淀。
2.滅菌和消毒菌種培養(yǎng)用的培養(yǎng)基應(yīng)連同培養(yǎng)容器用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌。小型生產(chǎn)性培養(yǎng)可把配好的培養(yǎng)液用普通鋁鍋或大型三角燒瓶煮沸消毒。大型生產(chǎn)性培養(yǎng)則把經(jīng)沉淀砂濾后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用。
3.培養(yǎng)基配制根據(jù)所培養(yǎng)種類的營養(yǎng)需要選擇合適的培養(yǎng)基配方。按培養(yǎng)基配方把所需物質(zhì)稱量,逐一溶解,混合,配成培養(yǎng)基。也可先配成母液,使用時(shí)按比例加入一定的量即可。
(三)接種培養(yǎng)基配好后,應(yīng)立即進(jìn)行接種。光合細(xì)菌生產(chǎn)性培養(yǎng)的按種量比較高,一般為20%~50%,即菌種母液量和新配培養(yǎng)液雖之比為1∶4~1∶1,不應(yīng)低于20%,尤其是微氣培養(yǎng),接種量更應(yīng)高些,否則光合細(xì)菌在培養(yǎng)液中很難占絕對優(yōu)勢,影響培養(yǎng)的最終產(chǎn)量和質(zhì)量。
(四)培養(yǎng)管理光合細(xì)菌的培養(yǎng)過程中,管理工作包括日常管理操作和測試,生長情況的觀察、檢查以及出現(xiàn)問題的分析處理等三個(gè)方面。