大腸桿菌在生物技術(shù)中的應(yīng)用

大腸桿菌作為外源基因表達的宿主,遺傳背景清楚,技術(shù)操作簡單,培養(yǎng)條件簡單,大規(guī)模發(fā)酵經(jīng)濟,倍受遺傳工程專家的重視.目前大腸桿菌是應(yīng)用最廣泛,最成功的表達體系,常做高效表達的首選體系

真核基因在大腸桿菌中表達,必須有合適的表達載體(Vector),常用載體:pBV220,pET系統(tǒng)

目的基因在大腸桿菌中表達的情況:

大腸桿菌更適合原核基因的表達,外源基因表達產(chǎn)量與單位體積產(chǎn)量是正相相關(guān)的,而單位體積產(chǎn)量與細胞濃度和每個細胞平均表達產(chǎn)量呈正相相關(guān).細胞濃度與生長速率,外源基因拷貝數(shù)和表達 產(chǎn)物產(chǎn)量之間存在動態(tài)平衡,單個細胞的產(chǎn)量又與外源基因拷貝數(shù),基因表達效率,表達產(chǎn)物的穩(wěn)定性和細胞代謝負荷等因素有關(guān)。

大腸桿菌的菌落形態(tài):

大腸桿菌在普通瓊脂培養(yǎng)基上面都是一樣的,圓形邊緣整齊，表面光滑，半透明，小凸起；典型的大腸桿菌在伊紅美藍瓊脂平板上的特征為：深紫黑色、光滑、濕潤、帶有金屬光澤的圓形菌落。

大腸桿菌是動物腸道中的正常寄居菌，其中很小一部分在一定條件下引起疾病 。大腸桿菌的血清型能夠引起人體或動物胃腸道感染，主要是由特定的菌毛抗原、致病性毒素等感染引起的，除胃腸道感染以外，還會引起尿道感染、關(guān)節(jié)炎、腦膜炎以及敗血型感染等。