熒光定量PCR實驗中的空白對照解析

熒光定量PCR實驗中的空白對照

無模板空白對照

NTC是指不含有模板（陽性模板或者陰性模板）的對照。目前的試劑盒的NC一般都是水或陰性緩沖液，所以NC等同于NTC。其實兩者有不同的作用。

儀器空白對照

NTC是含有引物探針和反應(yīng)液主要監(jiān)控引物探針，反應(yīng)體系有沒有被污染。這里的儀器空白對照我通常使用的是空反應(yīng)管來監(jiān)控儀器有無非特異性的熒光信號。

熒光染料對照

最常使用的是ROX染料，由于熒光定量PCR的熒光信號在每個樣品孔會有微小的差異所以使用特定的ROX熒光染料，系統(tǒng)可以根據(jù)ROX熒光染料的信號值來校準(zhǔn)每孔的熒光信號。