【細(xì)胞密度】影響細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵點(diǎn)分析

細(xì)胞培養(yǎng)是生物學(xué)研究中，一類重要的實(shí)驗(yàn)方法。細(xì)胞養(yǎng)不好，細(xì)胞生物學(xué)研究也就無從談起。影響細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)的因素有很多，細(xì)胞的密度，就是其中重要的一項(xiàng)。

通常，細(xì)胞密度是指每單位面積或體積的細(xì)胞數(shù)。

細(xì)胞培養(yǎng)的適宜細(xì)胞密度取決于特定的細(xì)胞類型和培養(yǎng)目的。不同的細(xì)胞由于來源不同，特性也會(huì)有所不同，有的細(xì)胞比較依賴于高密度才能生長，所以在進(jìn)行復(fù)蘇、傳代等操作時(shí)需要注意。

生長速度慢的細(xì)胞，譬如內(nèi)皮細(xì)胞，初始細(xì)胞密度略高一些，生長狀態(tài)會(huì)比較好；還有一些細(xì)胞生長速度比較快，如巨噬細(xì)胞或某些腫瘤細(xì)胞，初始細(xì)胞密度較低更有利于其狀態(tài)的調(diào)整。 那么細(xì)胞密度究竟是如何影響細(xì)胞培養(yǎng)的？

首先，細(xì)胞密度直接影響細(xì)胞的生長速率。在細(xì)胞密度較低的情況下，細(xì)胞有更多的空間和養(yǎng)分供應(yīng)，因此可以更快地生長和繁殖。但是，在細(xì)胞密度過高的情況下，細(xì)胞之間會(huì)發(fā)生競爭，養(yǎng)分和空間變得有限，導(dǎo)致細(xì)胞的生長速率減緩。因此，細(xì)胞密度應(yīng)該適當(dāng)控制，以保證細(xì)胞的生長速率和細(xì)胞數(shù)量的平衡。

其次，細(xì)胞密度還會(huì)影響細(xì)胞的分化。在細(xì)胞密度較低的情況下，細(xì)胞會(huì)傾向于分化為較多的類型，而在細(xì)胞密度較高的情況下，細(xì)胞則更可能傾向于保持未分化狀態(tài)。這是因?yàn)榧?xì)胞在低密度情況下感受到更少的細(xì)胞-細(xì)胞相互作用，從而導(dǎo)致細(xì)胞分化。而在高密度情況下，細(xì)胞之間的相互作用增加，導(dǎo)致細(xì)胞更傾向于維持未分化狀態(tài)。

此外，細(xì)胞密度還會(huì)影響細(xì)胞的代謝。
在細(xì)胞密度較低的情況下，細(xì)胞需要更多的營養(yǎng)物質(zhì)來維持其生長和繁殖，從而導(dǎo)致代謝速率的增加。但是，在細(xì)胞密度過高的情況下，細(xì)胞之間的相互作用和競爭增加，細(xì)胞需要更多的代謝產(chǎn)物才能生存和生長，從而導(dǎo)致代謝速率的降低。

在了解細(xì)胞密度對細(xì)胞培養(yǎng)的影響后，我們要做的就是將理論應(yīng)用于實(shí)戰(zhàn)。細(xì)胞密度的調(diào)控可以通過改變細(xì)胞的種植密度、培養(yǎng)容器的大小以及細(xì)胞營養(yǎng)物質(zhì)的供應(yīng)量等多種方式來實(shí)現(xiàn)。

細(xì)胞接種密度的調(diào)整
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)過程中，常用血球計(jì)數(shù)板對細(xì)胞密度進(jìn)行測定。隨著科技的發(fā)展，更為先進(jìn)的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀得到推廣，使得計(jì)算細(xì)胞密度更為高校和準(zhǔn)確。

細(xì)胞培養(yǎng)容器的選擇
一般情況下，塑料器皿更適合生長速度比較慢的細(xì)胞，玻璃器皿更適合生長速度快的細(xì)胞；對于同一種細(xì)胞，在其生長速度慢的時(shí)候（比如細(xì)胞剛復(fù)蘇時(shí)或者原代培養(yǎng)），塑料器皿的培養(yǎng)效果相對更好；而在其生長旺盛的時(shí)候，玻璃器皿則相對更好。

注意：以上情況只提供規(guī)律及思路，還需根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)具體情況而定。

細(xì)胞營養(yǎng)物質(zhì)的供給
通過調(diào)整培養(yǎng)液的營養(yǎng)物質(zhì)濃度和供應(yīng)量來達(dá)到相應(yīng)的細(xì)胞密度，根據(jù)細(xì)胞的生理特性，調(diào)節(jié)血清與基礎(chǔ)培養(yǎng)基的比例，或者各類生長因子與基礎(chǔ)培養(yǎng)基的比例，來調(diào)控細(xì)胞的生長速率，進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞密度。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)需要用到胎牛血清。作為一種重要的添加成分，胎牛血清品質(zhì)的優(yōu)劣，在一定程度上決定了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否理想。

遠(yuǎn)慕生物供應(yīng)進(jìn)口特級(jí)胎牛血清，采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。富含各類的生長發(fā)育因子，理論上支持各種細(xì)胞的生長。出廠前均應(yīng)經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控，并附詳細(xì)《檢測報(bào)告》，血清從出廠，到實(shí)驗(yàn)室，全程低溫冷鏈保護(hù)，盡可能避免血清反復(fù)凍融。