遠(yuǎn)慕簡(jiǎn)述特異性IgG抗體的四種技術(shù)
2023-03-13 11:22 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
特異性IgG抗體技術(shù)都有什么?
1.鹽析法
多采用硫酸銨鹽析法或硫酸鈉鹽析法。
2.凝膠過濾法
蛋白質(zhì)分子量不同,通過凝膠介質(zhì)時(shí)的洗脫速度不同。血清蛋白的分級(jí)分離常用該法。按分子大小可分為3組:第1組:IgM和一些脂蛋白;第2組:IgG和較少量的IgA、IgD、IgE等;第3組:白蛋白、血清黏蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等。該法過濾條件溫和,不影響IgG活性。常結(jié)合鹽析法提取IgG。
3.離子交換層析法 常用的離子交換劑是DEAE纖維素。該法可獲得較純的IgG,且不影響抗體活性。
4.親和層析法 將純化抗原制成親和層析柱,抗血清通過層析柱時(shí),IgG被層析柱吸附。然后改變洗脫條件,使IgG從層析柱上解離。
抗體產(chǎn)生的規(guī)律和意義
1、初次應(yīng)答
抗原初次進(jìn)入機(jī)體后,經(jīng)一定的潛伏期才能產(chǎn)生漿細(xì)胞并合成和分泌抗體。在潛伏期,抗原被識(shí)別和加工,此期的特征是細(xì)胞增殖與分化,持續(xù)的時(shí)間與抗原的性質(zhì)及進(jìn)入機(jī)體的途徑有關(guān),例如菌苗經(jīng)5-9d,血液中就有抗菌抗體出現(xiàn);而類毒素則需2-3周后才合成抗毒素。潛伏期之后,抗體濃度呈對(duì)數(shù)增長(zhǎng),進(jìn)入對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期。繼而經(jīng)歷了穩(wěn)定狀態(tài)和衰退期,抗體水平迅速降低。上述各期的持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)短都與抗原性質(zhì)有密切關(guān)系。
一般來講,初次應(yīng)答所產(chǎn)生的抗體量不多,持續(xù)時(shí)間也短。td抗原刺激機(jī)體可產(chǎn)生數(shù)種類型的免疫球蛋白,如在預(yù)防接種或自然感染后,最后出現(xiàn)的是igm,其消失也快,在血中字持續(xù)數(shù)周至數(shù)日。其次出現(xiàn)的是igg,在igm接近消失時(shí),igg達(dá)高峰階段,在血中持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。iga出現(xiàn)最晚,常在igm和igg出現(xiàn)兩周以至1-2月后才能在血中測(cè)出,其含量也低,但持續(xù)時(shí)間亦較長(zhǎng)。
2、再次應(yīng)答
在第一次接受抗原刺激使機(jī)體產(chǎn)生一定量抗體后,數(shù)日、數(shù)月乃至數(shù)年再次接種相同抗原,開始時(shí)原抗體量稍有下降,稱為負(fù)相期??赡苁怯捎谝徊糠衷械目贵w被再次進(jìn)入的抗原所結(jié)合;從而暫減低了抗體,但短期內(nèi)抗體量迅速增加,可比原來抗體量高數(shù)倍至數(shù)十倍,以igg為主,在體內(nèi)持續(xù)時(shí)間也長(zhǎng)。igm很少增加。
回憶反應(yīng)是再次應(yīng)答的特殊形式,發(fā)生在機(jī)體對(duì)抗原初次應(yīng)答產(chǎn)生的抗體消失后,再次接觸抗原物質(zhì),使已消失的抗體再度出現(xiàn),并迅速達(dá)高峰。這是由于原刺激在體內(nèi)留下的免疫記憶細(xì)胞保留了原來的抗原信息。若后來刺激的抗原與初次相同(完全相同或僅載體決定蔟相同),則為特異性回憶反應(yīng)。非特異性回憶反應(yīng)系指第二次接觸的抗原與初次不同,所引起的抗體上升是短暫的,短期內(nèi)即復(fù)下降。
上述規(guī)律在疾病的預(yù)防和診斷中具有重要意義。例如,初次接種疫苗須在疾病流行前數(shù)周進(jìn)行,并一般應(yīng)接種2次以上;應(yīng)用血清學(xué)試驗(yàn)診斷傳染病時(shí),需在疾病初期和晚期采兩份血清,以動(dòng)態(tài)觀察,若第二次血清抗體水平比第一次高4倍以上者,有診斷意義。