輻照后的血清對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)有影響嗎

血清為細(xì)胞正常生長(zhǎng)提供必要的營(yíng)養(yǎng)成分，而血清也是很容易受到外界因素影響的，所以有些會(huì)對(duì)血清采取鈷60γ射線照射也就是我們所謂的輻照血清。那么血清被輻照后會(huì)對(duì)本身產(chǎn)品品質(zhì)影響嗎？下面遠(yuǎn)慕為大家解惑。

輻照型血清是將正常血清經(jīng)過(guò)三次無(wú)菌過(guò)濾后再用鈷-60輻射滅菌制得的血清。輻照血清是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基，它具有促進(jìn)細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞分化等的生物學(xué)功能其質(zhì)量的好壞直接影響著生物制品的安全性。 早在2004年之前，西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院的研究人員就用已知大腸桿菌噬菌體為陽(yáng)性的同批新生牛血清進(jìn)行過(guò)測(cè)試。他們選擇了一系列不同的輻照劑量，具體為4、8、12、18、24、28、32、40、44、48kGy(所用劑量率為4.37Gy/min），檢測(cè)了新生牛血清輻照前后的總蛋白含量，發(fā)現(xiàn)其總蛋白含量沒(méi)有顯著變化。他們又檢查了輻照前后的大腸桿菌噬菌體。發(fā)現(xiàn)在輻射劑量≥8kGy時(shí)，能完全殺滅大腸桿菌噬菌體。

他們還檢測(cè)了輻照后血清的促細(xì)胞生長(zhǎng)效應(yīng)。他們把血清按10%比例添加到MEM中。在96孔板中，細(xì)胞培養(yǎng)接種濃度為1X104個(gè)/ml，每孔加0.2ml。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，輻照劑量＜16kGy時(shí)，輻照后的新生牛血清和輻照前比，Vero細(xì)胞的最大增殖濃度無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。在輻照劑量＜24kGy時(shí)，Vero細(xì)胞的倍增時(shí)間也無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。但輻照劑量＞24kGy時(shí)，Vero細(xì)胞的倍增時(shí)間則明顯延長(zhǎng)1。

血清功能：

1:提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。

2:提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

3:是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。

4:起酸堿度緩沖液作用。

5:提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。應(yīng)用適用于正常封閉與增殖旺盛的常規(guī)細(xì)胞系的培養(yǎng)等。