什么是PBS緩沖液?
PBS是磷酸緩沖鹽溶液一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na ?HPO ? 、KH?PO ? 、NaCl和KCl。PBS緩沖液不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。
由于Na?HPO ? 和KH?PO ? 它們有二級(jí)解離,緩沖的pH值范圍很廣;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1 mmol/L CaCl?和0.5 mmol/L MgCl?,以提供雙價(jià)陽離子。
pbs緩沖液的配制配方是10X的PBS母液,然后再對(duì)其母液進(jìn)行1:10稀釋即可獲得PBS緩沖液。
PBS是磷酸鹽緩沖液(PhosphateBuffer Saline),是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室最常用的緩沖液之一。其主要成分包括:氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)和磷酸二氫鉀(KH2PO4)。
配制步驟:
清洗干凈所需燒杯、轉(zhuǎn)子和量筒,向一個(gè)燒杯裝少量去離子水(約100ml)并放入一個(gè)轉(zhuǎn)子后放在稱量天平旁備用;向另一個(gè)燒杯裝約800ml去離子水并在微波爐或者水浴鍋(65°以上均可)中加熱。
注意:由于實(shí)驗(yàn)室所購(gòu)買的Na2HPO4常常帶有二水、七水或者十二水,與之對(duì)應(yīng)的重量分別為1.78g、2.68g、3.58g。
向燒杯中加入預(yù)熱的去離子水,燒杯放置在磁力攪拌器上攪拌溶解。用量筒定容到1L,保存?zhèn)溆谩?br>
取100ml 10X的PBS母液,加入900ml去離子水即可獲得pH=7.4的PBS緩沖液(無需用pH計(jì)校準(zhǔn)PH值)。