PIPES全名哌嗪-1,4-二乙磺酸,是一種兩性離子生物緩沖劑,也是GOOD’S緩沖劑里的一種。具有高水溶性、底細(xì)胞膜通透性、穩(wěn)定的酸堿解離性、低金屬螯合能力、高化學(xué)穩(wěn)定性,并且能在紫外線和可見(jiàn)光區(qū)中低吸收光譜等優(yōu)良特性。
PIPES作為一種應(yīng)用非常廣泛的緩沖劑,在植物組化學(xué)中可以以最小化戊二醇固定導(dǎo)致的脂質(zhì)損傷和實(shí)驗(yàn)假象。由于PIPES的pka十分接近生理性PH值,因此非常適合體外細(xì)胞培養(yǎng)。但是PIPES能形成自由基,所以不適合用于氧化還原反應(yīng)中。
那么,在使用PIPES時(shí),需要注意些什么呢?
1、為了確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,首先需要將使用的容器用純凈的清水清洗三遍以上,其次確保使用的溶液均未純凈水,并且對(duì)實(shí)驗(yàn)所需的溶液事先做空白值檢測(cè)。
2、由于PIPES是一種對(duì)光線敏感,容易分解的溶液,因此最好存放在專(zhuān)門(mén)帶塞的棕色試劑瓶中,確保將外界對(duì)PIPES緩沖劑的影響降到最低。
3、在配置好PIPES緩沖溶液后,應(yīng)該及時(shí)注明配置時(shí)間、濃度、規(guī)格和名稱(chēng)等信息,以方便后續(xù)實(shí)驗(yàn)時(shí)使用。并且最好是隨配隨用,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4、在使用PIPES時(shí),需要做好防護(hù)工作,避免沾到皮膚上造成一定的傷害。
5、需要配制濃度最合適的緩沖液,因?yàn)閷?shí)驗(yàn)中篩選細(xì)胞時(shí),濃度太高的緩沖液會(huì)殺死所有細(xì)胞,濃度太低則達(dá)不到篩選的作用,兩種情況都會(huì)干擾最后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。