培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢和死亡的原因

培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢這種情況可能的原因包括：

1．由于更換了不同培養(yǎng)液或血清，細(xì)胞需要重新適應(yīng)。

2．試劑保存不當(dāng)，培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。

3．培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染。

4．接種細(xì)胞起始濃度太低。

5．細(xì)胞已老化。

6．支原體污染。

建議解決方法：

1．比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實驗。讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。

2換入新鮮配制培養(yǎng)液，或補加谷氨酰胺及生長因子。

3．用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，更換培養(yǎng)物。

4．培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存，并在2周內(nèi)用完。

5．增加接種細(xì)胞起始濃度。

6．換用新的保種細(xì)胞。

7.隔離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，更換新的培養(yǎng)物。

培養(yǎng)細(xì)胞死亡的原因：

常見的可能原因是細(xì)胞傳代時，消化過度，細(xì)胞嚴(yán)重受傷。如經(jīng)驗不足，細(xì)胞傳代消化時，在顯微鏡下觀察，至細(xì)胞變圓、脫壁，加入含血清的培養(yǎng)液，終止消化。其他原因包括長途運輸，細(xì)胞在不適宜的溫度下時間過長；培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分消耗殆盡，沒有及時換液。如果原來細(xì)胞狀態(tài)較好，換液后細(xì)胞死亡，應(yīng)考慮是培養(yǎng)液及血清的質(zhì)量。-好事先已證明培養(yǎng)液及血清質(zhì)量良好。