ELISA、WB、Q-PCR采樣及取樣注意事項(xiàng)
2022-10-11 9:59 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
ELISA取樣及運(yùn)輸注意事項(xiàng)
一、血清提取方法:
1.全血促凝管取血,輕輕顛倒兩三次,放置片刻讓全血凝固,凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。
2.全血普通EP管取血,室溫放置2h左右,讓其凝固,凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。
特別注意:取血清避免震蕩,以防止溶血,溶血會(huì)對(duì)結(jié)果有影響。
二、樣本取量及運(yùn)輸
每個(gè)指標(biāo)做單孔檢測,一個(gè)樣本需取血清30ul,3個(gè)復(fù)孔需90 ul,冰盒-20度中短時(shí)運(yùn)輸(小鼠建議采取摘眼球取血,如果血樣有限在試驗(yàn)方案允許的前提下可以取多只小鼠血樣混合)。
三、樣本編號(hào)
樣本標(biāo)號(hào):
組別及樣本標(biāo)號(hào),要在管壁上標(biāo)注清晰,特別注意6,9的區(qū)分,可以使用英文標(biāo)注。切記提供我司樣本清單。
WB、Q-PCR取樣及運(yùn)輸注意事項(xiàng)
一、細(xì)胞收集及保存
1、貼壁細(xì)胞胰酶消化后900轉(zhuǎn)5min離心至管底(非貼壁細(xì)胞直接離心),棄上清,將細(xì)胞凍存與-80度長期保存,-20度,暫時(shí)保存。若用于Q-PCR盡量使用滅菌無RNA酶離心管,trizon或RNA樣本保存液中-80度長期保存。
2、組織樣本取樣后立即-80或者液氮保存。后續(xù)用于Q-PCR的取樣后立即存于液氮或者-80度環(huán)境中,或者放于有trizon或RNA樣本保存液的滅菌無RNA酶離心管中-80度保存。
二、樣本運(yùn)輸
短時(shí)2h左右冰袋或者液氮運(yùn)輸,干冰(干冰可以維持-70度)密封郵寄運(yùn)輸。
三、樣本編號(hào)
樣本標(biāo)號(hào)清晰,切記提供我公司(遠(yuǎn)慕生物)樣本清單。
病理實(shí)驗(yàn)取樣及實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
1、動(dòng)物組織提取后(玉米粒大小即可)迅速保存于4%多聚甲醛中固定,管體標(biāo)號(hào),組織塊盡量少帶血液,或可以用多聚甲醛將樣本稍作清洗,常溫保存,常溫運(yùn) 輸。做電鏡的樣本由2.5%戊二醛固定于15ml離心管內(nèi),樣本直徑小于2mm,常溫保存常溫運(yùn)輸。提供我公司樣本清單。
2、細(xì)胞樣本制作成爬片后PBS浸潤保存與細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi),密封常溫運(yùn)輸。做電鏡的細(xì)胞離心收集好后2.5%戊二醛固定,常溫運(yùn)輸。