培養(yǎng)液pH對細(xì)胞會有影響嗎？

由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2-7.4，偏離此范圍可能對細(xì)胞生長將產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對pH的要求也不完全相同，原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對pH變動耐受差，無限細(xì)胞系耐受力強。但總體來說，細(xì)胞耐酸性比耐堿性強一些。在配制培養(yǎng)用液時，需要注意一點：培新配的培養(yǎng)基在經(jīng)過0.10um或0.22um濾膜過濾時，溶液的pH還會向上浮動0.2左右。 培養(yǎng)液pH下降很快可能原因有哪些？其解決辦法是什么？

通常細(xì)胞生長得非常快時，pH值通常下降得很快。此時可以及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外，培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊、NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細(xì)菌、酵母或真菌污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。

(1)按培養(yǎng)液中NaHCO3 濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2 濃度，2.0g/L 到3.7g/L 濃度NaHCO3對應(yīng)CO2濃度為5％到10％。

(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液。

(3)松開瓶蓋1/4 圈。加HEPES 緩沖液至10 到25mM終濃度。

(4)在CO2 培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle′s 鹽配制的培養(yǎng)液，在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks 鹽配制的培養(yǎng)液。

(5)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。