MRS瓊脂基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)原理
2022-08-01 14:32 來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
中文名稱:MRS瓊脂基礎(chǔ)
英文名稱:MRS AGAR
供應(yīng)商:遠(yuǎn)慕生物
產(chǎn)品規(guī)格:250ml
用途:MRS瓊脂培養(yǎng)基可用于乳桿菌鑒定中的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。
簡(jiǎn)介:乳酸桿菌MRS瓊脂(LactobacilliMRSAgar),是弱選擇性培養(yǎng)基,支持絕大多數(shù)乳酸菌的旺盛生長(zhǎng)。
工作原理:蛋白胨提供氮源。牛肉浸粉和酵母提取物作為維生素來(lái)源。葡萄糖是可發(fā)酵的碳水化合物。培養(yǎng)基的微酸性環(huán)境,有利于乳酸桿菌的生長(zhǎng)。乙酸鈉和檸檬酸銨是選擇劑,同時(shí)也是能量物質(zhì)。乙酸鈉對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌和霉菌有抑制作用,但對(duì)乳酸桿菌無(wú)影響。硫酸鎂和硫酸錳提供代謝必需的離子。司班80或吐溫80是非離子型表面活性劑,輔助乳桿菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用。瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
使用說(shuō)明
稱取本品44.3g于1L蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,按試驗(yàn)需求加入其它營(yíng)養(yǎng)成分,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,滅菌結(jié)束后請(qǐng)務(wù)必?fù)u勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而結(jié)塊。
乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)是一類能利用可發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生大量乳酸的細(xì)菌的統(tǒng)稱。這類細(xì)菌在自然界分布極為廣泛,具有豐富的物種多樣性,至少包含18個(gè)屬,共200多種。除極少數(shù)外,其絕大部分都是人體內(nèi)必不可少的、且具有重要生理功能的菌群,廣泛存在于人體的腸道中。
乳酸菌不僅是研究分類、生化、遺傳、分子生物學(xué)和基因工程的理想材料(在理論上具有重要的學(xué)術(shù)價(jià)值),而且在工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)、食品和醫(yī)藥等與人類生活密切相關(guān)的重要領(lǐng)域具有極高的應(yīng)用價(jià)值。
應(yīng)用說(shuō)明:用于豬源性嗜酸乳桿菌的分離馴化及其微膠囊化的研究
嗜酸乳桿菌作為動(dòng)物腸道中重要的益生菌,具有維護(hù)動(dòng)物腸道健康、緩解不良應(yīng)激、改善飼養(yǎng)環(huán)境、調(diào)節(jié)機(jī)體脂肪代謝和改善畜禽產(chǎn)品品質(zhì)等功能。乳酸菌微生態(tài)制劑作為動(dòng)物飼料添加劑正逐漸被廣大消費(fèi)者應(yīng)用。
從仔豬糞便中分離獲得一株嗜酸乳桿菌經(jīng)馴化,提高其對(duì)胃腸道的耐受性,并研制出微膠囊制劑,其研究結(jié)果如下:
(1) 利用MRS瓊脂平板梯度稀釋法自15d齡、未使用過(guò)任何抗生素藥物的仔豬糞便中篩選得到13株乳酸桿菌疑似菌株,通過(guò)生理生化鑒定,初步確定其中9為乳酸桿菌。經(jīng)碳水化合物發(fā)酵試驗(yàn),推測(cè)編號(hào)La-5,La-6,La-8和La-9的4株菌為嗜酸乳桿菌。比較4株菌的形態(tài),長(zhǎng)勢(shì)及產(chǎn)酸能力,選定菌株La-5作為本研究的出發(fā)菌株。通過(guò)對(duì)菌株La-5的16 SrDNA同源性分析,結(jié)合其生理生化試驗(yàn)結(jié)果確定菌株La-5為嗜酸乳桿菌(Lactobaclllus acidophilus)。
(2) 以嗜酸乳桿菌La-5為出發(fā)菌株,采用梯度傳代馴化法,對(duì)其耐酸、耐膽鹽、耐熱性能進(jìn)行馴化,得到一株對(duì)低pH、高膽鹽、高溫具有良好強(qiáng)耐受性的優(yōu)良菌株La-5c。對(duì)菌株La-5c的產(chǎn)酸性能研究表明,經(jīng)發(fā)酵48h后的MRS培養(yǎng)液的總酸含量為12.88g/L,較空白培養(yǎng)液提高了大約4.8倍。說(shuō)明嗜酸乳桿菌La-5c具有良好的產(chǎn)酸性能,適合制成菌劑應(yīng)用于動(dòng)物飼料添加劑。
(3)用嗜酸乳桿菌La-5c喂養(yǎng)小白鼠,進(jìn)行安全性及益生效果評(píng)價(jià),結(jié)果表明菌株La-5c安全、無(wú)毒副作用,可明顯增加小白鼠的體重,降低飼料的使用量,促進(jìn)小白鼠對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收轉(zhuǎn)化,明顯改善小白鼠的免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育。說(shuō)明嗜酸乳桿菌La-5c具有很好的益生效果。