抗體制備所需的基本要求有哪些！

啟動(dòng)抗體制備前，我們需要搞清楚一下7個(gè)問(wèn)題：

1.這個(gè)抗體用來(lái)做什么實(shí)驗(yàn)(ELISA、IHC、Western Blot、IF或者IP等)?（功能性要求）
2.是否已有商品化的抗體可以滿(mǎn)足以上功能需求?（便利性要求）
3.抗體需要什么種屬來(lái)源（兔子、山羊、大鼠或小鼠等）?（抗體屬性要求）
4.需要多抗還是單抗?（品質(zhì)性要求）；
5.已具備的抗原信息或材料（抗原信息或材料：CDS序列，重組質(zhì)粒，重組蛋白、多肽等）?（可能性要求）；
6.是否可建立抗體質(zhì)檢方法（標(biāo)準(zhǔn)的陽(yáng)性標(biāo)本及實(shí)施抗體實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)方法）?（可評(píng)價(jià)要求）
7.是否具備抗體生產(chǎn)平臺(tái)及經(jīng)驗(yàn)?（可行性要求）。

第一個(gè)要求——功能性要求：科研人員根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求提出對(duì)抗體的功能性要求;對(duì)一個(gè)抗體功能要求越多，其制備難度也就越大。

第二個(gè)要求——便利性要求：科研工作者對(duì)抗體提出需求,首先應(yīng)考慮商品化抗體:優(yōu)質(zhì)商品化抗體一般都經(jīng)過(guò)多層驗(yàn)證和優(yōu)化,可以直接購(gòu)買(mǎi)使用,節(jié)約時(shí)間。一個(gè)抗體很難同時(shí)滿(mǎn)足幾項(xiàng)功能要求，這個(gè)時(shí)候可以考慮分別選購(gòu)針對(duì)不同功能的抗體；除此之外，還需仔細(xì)查看抗體數(shù)據(jù)信息和實(shí)驗(yàn)圖片，其實(shí)驗(yàn)所采用的標(biāo)本和方法與自己準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本越相似越好。

第三個(gè)要求——抗體種屬要求：制備多抗選用最多的是兔子，單抗選用最多的是小鼠，對(duì)于抗體需求量較大，比如二抗，一般選擇山羊。對(duì)于其他種屬要求，除實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需求，更多是因?yàn)榭乖c免疫宿主親緣關(guān)系問(wèn)題，一般來(lái)說(shuō)親緣關(guān)系越遠(yuǎn)，免疫原性越好。

第四個(gè)要求——品質(zhì)性要求：大部人認(rèn)為單抗比多抗好,其實(shí)也不盡然。單抗的特異性好，對(duì)于需要區(qū)分鑒定同源性較高的抗原或者對(duì)于特異性要求較高時(shí)，一般選擇單抗；另外，單抗性質(zhì)比較穩(wěn)定，理化性質(zhì)均一（所有的抗體都是由相同細(xì)胞分泌出來(lái)）。多抗的優(yōu)點(diǎn)是效價(jià)和靈敏度高，其針對(duì)一個(gè)抗原的多表位；與單抗相比，待檢標(biāo)本中同樣的蛋白表達(dá)豐度，多抗會(huì)有更多抗體分子與抗原結(jié)合，信號(hào)更強(qiáng)，當(dāng)然也可能引起非特異性問(wèn)題。

第五個(gè)要求——可能性要求：大部人認(rèn)為單抗比多抗好,其實(shí)也不盡然。單抗的特異性好，對(duì)于需要區(qū)分鑒定同源性較高的抗原或者對(duì)于特異性要求較高時(shí)，一般選擇單抗；另外，單抗性質(zhì)比較穩(wěn)定，理化性質(zhì)均一（所有的抗體都是由相同細(xì)胞分泌出來(lái)）。多抗的優(yōu)點(diǎn)是效價(jià)和靈敏度高，其針對(duì)一個(gè)抗原的多表位；與單抗相比，待檢標(biāo)本中同樣的蛋白表達(dá)豐度，多抗會(huì)有更多抗體分子與抗原結(jié)合，信號(hào)更強(qiáng)，當(dāng)然也可能引起非特異性問(wèn)題。

第六個(gè)要求——可評(píng)價(jià)性要求：篩選方案和純化方法對(duì)抗體制備至關(guān)重要，質(zhì)檢方法決定一個(gè)抗體的命運(yùn)，你用什么篩選方法你就得到什么樣的抗體，所以在抗體制備之前必須要保證建立一個(gè)科學(xué)穩(wěn)定符合質(zhì)檢要求的抗體制備方法。

最后一個(gè)要求——可行性要求：制備抗體前必須要擁有制備流程所必須的平臺(tái)設(shè)備以及專(zhuān)業(yè)人員，如果實(shí)驗(yàn)室以前沒(méi)有涉及這塊并且以后也不打算建設(shè)此類(lèi)平臺(tái)，本著“專(zhuān)業(yè)人做專(zhuān)業(yè)事最節(jié)約成本”的原則，抗體制備的整個(gè)流程或者部分環(huán)節(jié)還是委托給專(zhuān)業(yè)公司。

Tips：專(zhuān)業(yè)抗體公司基本特點(diǎn) 1）有專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員，可以回答您的實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，所回答的問(wèn)題實(shí)用，能解決問(wèn)題。2）有專(zhuān)業(yè)平臺(tái)，制備抗體上下游有比較完善的平臺(tái)，這個(gè)可以咨詢(xún)他們的業(yè)務(wù)范圍。
3）商業(yè)口碑：身邊實(shí)驗(yàn)室有沒(méi)有在此公司合作成功的案例。