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![雙[三(羥甲基)氨基甲烷],CAS:6976-37-0](http://struc.chem960.com/strucimg/7000/ctzw0nzi34oyob9fnlmhiwee.png)
由于血清來(lái)源于動(dòng)物，且含有細(xì)胞培養(yǎng)中所需的各種營(yíng)養(yǎng)（血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等），這奠定了血清是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中最普遍的試劑的基礎(chǔ)。
目前血清采集地主要分布在以下國(guó)家：
市面上的牛血清產(chǎn)品名稱(chēng)雖然五花八門(mén)，但根據(jù)其不同的特性，追其根本，大致可分為以下四種。根據(jù)牛的取血年齡可以區(qū)分：
胎牛血清（Foetal Bovine Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹心臟穿刺采血得來(lái)的血清。
國(guó)產(chǎn)胎牛血清（并無(wú)明確定義，但通常用此命名）指的是出生4-6小時(shí)，且未進(jìn)行哺乳（unsuckled）進(jìn)食的新生牛，有時(shí)還稱(chēng)作國(guó)產(chǎn)新生牛血清。
新生牛血清（Newborn Calf Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)NBCS，或稱(chēng)小牛血清）指的是出生14天-3個(gè)月進(jìn)行取血的牛血清。
成年牛血清（Adult Bovine Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)ABS）指的是取血時(shí)牛齡通常超過(guò)12個(gè)月的牛血清。
以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒?guó)家畜牧業(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響，因?yàn)榕Ｑ酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè)，并未有專(zhuān)門(mén)為取血而養(yǎng)的牛。
幾種血清的比較：
這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來(lái)說(shuō)，年齡越小的牛血清，細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛，且因?yàn)樘ヅＮ催M(jìn)食過(guò)母乳，所以IgG含量低。故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
胎牛血清根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求的不同又進(jìn)行了特殊加工工藝加工，那么在這么多種類(lèi)的血清面前，要怎么選擇適合自己細(xì)胞培養(yǎng)的那一款呢？
★ 我們需要知道都有哪些種類(lèi)的牛血清和它們的用途：
1、透析血清
分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)定特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中。
2、碳吸附血清
使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lèi)(lipophilic)物質(zhì)，如某些激素、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子等，去除作用對(duì)分子量大小并無(wú)區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗(yàn)證激素的作用效果。
3、去外泌體血清
適用于收集細(xì)胞分泌的外泌體時(shí)使用。
4、低IgG血清
用于研究抗體、病毒和病毒反應(yīng)、細(xì)胞表面抗原表位。
5、四環(huán)素血清
應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)(Tet-on, Tet-off)，以及其它對(duì)四環(huán)素敏感的實(shí)驗(yàn)中。
6 、IR (輻照)
鈷60伽馬輻照劑量在3.5Mrad. 通過(guò)直接與間接作用將生物大分子（如核酸）鍵結(jié)破壞，人畜用藥物/疫苗，及對(duì)微生物負(fù)荷(Bioburden)要求最高水平的實(shí)驗(yàn)。
7、HI (熱滅活)處理血清
56℃, 30Min, 破壞補(bǔ)體，確保細(xì)胞與抗體結(jié)合不會(huì)發(fā)生裂解。
8、胚胎干細(xì)胞（ES）專(zhuān)用血清
是從多個(gè)批次的胎牛血清篩選出特定批號(hào)，適用于人及小鼠胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞及原代細(xì)胞長(zhǎng)期培養(yǎng)。
9、間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）專(zhuān)用血清
從多個(gè)批次的胎牛血清篩選出特定批號(hào)，經(jīng)過(guò)骨髓，脂肪組織及臍帶來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞活性嚴(yán)格測(cè)試，通過(guò)傳代及分化比例測(cè)試。
其他動(dòng)物血清
10、馬血清
10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應(yīng)答, 常與牛血清結(jié)合或單獨(dú)作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的補(bǔ)充培養(yǎng)基。
11、豬血清
豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色，可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng), 疫苗生產(chǎn)（生產(chǎn)支原體）, 中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒（AAV）, 用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化, 作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。
12、兔血清
正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面，各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。
13、羊血清
用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細(xì)胞系和原代培養(yǎng)物上，F(xiàn)BS的合適替代物，病毒分離和鑒定，病毒學(xué)研究。
用作魚(yú)類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)的有效NBCS替代物。
可成功地代替胎牛血清在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中長(zhǎng)期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。
胎牛血清成分已知的已有上千多種，以下為主要成分表：
各位老師可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求選擇不同的血清。
★ 我們同時(shí)為您收集了一些使用血清時(shí)的典型問(wèn)題：
01、血清的顏色如何？
為何有的胎牛血清顏色偏紅，而有的偏黃？是因?yàn)樘ヅＱ孱伾怯裳t蛋白（鮮紅）和膽紅素（黃）決定的，主要是受血紅蛋白影響。血紅蛋白含量很低時(shí)，含少量膽紅素，呈淡黃或金黃。血紅蛋白含量高時(shí)，會(huì)呈現(xiàn)淡紅色。
需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃冰箱（未開(kāi)封血清有效期為5年）。若存放于4℃，請(qǐng)勿超過(guò)1個(gè)月，若一次無(wú)法用完一瓶，建議將血清無(wú)菌分裝并冷凍。
02、血清如何解凍，使用前是否需要過(guò)濾？
血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。
本公司血清在ISO13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn)，經(jīng)過(guò)3次0.1μm過(guò)濾，出廠經(jīng)過(guò)檢測(cè)并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試及無(wú)菌檢測(cè)，污染幾率非常非常非常（重要的事情說(shuō)三遍）低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性，根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測(cè)，結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買(mǎi)來(lái)的血清不需要再次進(jìn)行過(guò)濾。
下圖為人肉眼和光學(xué)顯微鏡所能觀察到的微粒大小。由于我們的血清是經(jīng)過(guò)3次0.1μm過(guò)濾，因此若肉眼可以觀察到異物時(shí)，可以考慮：
是否血清溶解后蛋白質(zhì)凝集
是否操作時(shí)導(dǎo)入污染物
03、為什么血清中會(huì)有沉淀生成，主要成分是什么，會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)有什么影響？
血清中沉淀主要有：纖維蛋白（絮狀沉淀），胎球蛋白[1]，脂蛋白，冷凝集素，玻連蛋白，磷酸鈣（顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀），膽固醇等。
原因：造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活，反復(fù)凍融，長(zhǎng)期儲(chǔ)存于2-8℃或者室溫。
預(yù)防：非必要，不用熱滅活；避免反復(fù)凍融；-20℃保存；4℃全融（期間間斷搖晃均勻）；2000rpm離心5分鐘(不建議用0.2um濾膜過(guò)濾） ，取上清使用。
04、黑膠蟲(chóng)是來(lái)源于血清嗎？
目前科學(xué)界對(duì)黑膠蟲(chóng)的身份并無(wú)定論, 通常是顯微鏡下觀察到密密麻麻的小黑點(diǎn)在培養(yǎng)基中自主游動(dòng)，就稱(chēng)為黑膠蟲(chóng)污染。遠(yuǎn)慕生物技術(shù)服務(wù)部目前檢測(cè)的數(shù)十個(gè)所謂”黑膠蟲(chóng)”樣本，其中62%為細(xì)菌（如Sphingomonas paucimobilis，Blastomonas natatoria strain），38%為支原體（如：Mycoplasma hyorhinis，Mycoplasma pulmonis strain）。黑膠蟲(chóng)在鏡下的典型特征呈卵圓狀、球狀、桿狀等，可引起細(xì)胞生長(zhǎng)遲緩或裂解凋亡。目前沒(méi)有充分的數(shù)據(jù)表明黑膠蟲(chóng)來(lái)源于血清，因?yàn)槠涑叽邕h(yuǎn)大于血清過(guò)濾時(shí)所用的0.1微米(μm)濾膜。遠(yuǎn)慕小編建議各位老師通過(guò)使用三抗（Cat#: 03-032-1B）外加支原體處理試劑（Cat#: 03-038-1B）嘗試殺滅黑膠蟲(chóng)。
05、血清存在批間差嗎？
因?yàn)檠鍋?lái)源于動(dòng)物，其組成成分有1000種左右，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。每個(gè)批號(hào)的組分和百分比含量都是不固定的，所以批間差異是存在的。
建議先進(jìn)行批號(hào)測(cè)試，篩選出合適批號(hào)，購(gòu)買(mǎi)半年甚至一年以上的用量，避免批間差造成實(shí)驗(yàn)波動(dòng)（胎牛血清在-20℃保存可達(dá)5年）。