毒扁豆堿對乙酰膽堿作用的影響實驗的操作步驟

1.  連接好實驗裝置，保證實驗條件。
 
2.  記錄裝置的條件：將臺式平衡記錄儀量程旋紐置于 5 mv,打開記錄筆將筆調到記錄 的合適位置。取２ g 砝碼懸掛在換能器的小鉤上，調節(jié)載波放大器的“增益”、“調零”旋 鈕，使記錄筆上升１大格（25 mm），取下砝碼后，記錄筆又到原位置（加砝碼時調“增益” 旋鈕，取下砝碼時調“調零”旋鈕，需要重復數次即可）。記錄速度 8 mm/min。
 
3.  標本的制備：將蟾蜍破壞大腦與脊髓，背位固定于蛙板上，剪開腹部皮膚，在恥 骨上端以小鑷子分別穿線結扎左右腹直肌的肌腱，于結扎的下方剪斷肌建，沿腹白線向 上剪開（應注意避免剪斷腹壁內側的腹壁靜脈）以分離左右腹直肌，再沿腹直肌外緣向 上剪開，在第二腱劃高度分用線結扎兩側腹直肌，并在結扎線上方剪斷肌肉。標本制成 后，以 Ringer 氏液洗凈，放入置有 Ringer 氏液的燒杯內，備用。
 
本實驗選用蟾蜍腹直肌的理由是因為蟾蜍腹直肌對乙酰膽堿較敏感，藥物作用較緩 和、穩(wěn)定，易于比較收縮的高度。
 
4.  標本的懸掛：將腹直肌標本一端固定在浴管底部，另一端懸掛于力位移換能制的 小鉤上。腹直肌的張力變化通過力位移換能器、載波放大器后，記錄在臺式平衡記錄儀 上。懸掛好標本后, 立即換液１次，再給腹直肌標本加前負荷 2 g（上升１大格、25 mm 即 可），穩(wěn)定 30 分鐘，即可加藥。
 
5.  給藥方法：按累積給藥法，先觀察各濃度乙酰膽堿收縮蟾蜍腹直肌的量效關系， 給藥順序見表 4-8。然后沖洗，先沖洗４－５次，再每隔 10 分鐘換液１次，待腹直肌標 本重新恢復至基線（約 40 分鐘）后,加入 10-3 mol/L Physosti gmine（毒扁豆堿）0.1 ml,作用 15 分鐘后，仍按累積給藥法加入各度的乙酰膽堿，觀察毒 扁豆堿對乙酰膽堿量效關系的影響，給藥順序見表 4-9。