MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨細胞前體細胞說明書

        
 
 
 
 
 
 
五、組成：

 

六、細胞接收后的操作流程與注意事項
1. 您收到細胞時，若干冰已經(jīng)完全融化，請立即將細胞復蘇培養(yǎng)，切勿再次低溫凍存；若尚留有干冰，請立即將含有細胞的凍存管放入液氮中保存待用，并按指定條件貯存細胞，切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
2. 請您在接收細胞后的4周內(nèi)及時做復蘇培養(yǎng)，以確認細胞活力、狀態(tài)并保種。逾期恕不受理售后問題，謝謝合作！
3. BNCC凍存細胞采用優(yōu)化配比的細胞凍存液，無需離心，細胞解凍后直接將250 ul細胞懸液滴入裝有8-10 ml完全培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。

七、貼壁細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵守無菌操作）
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加1~2 ml 含0.25% EDTA的胰酶進行消化（注意把握消化時間，通?？刂圃?~2min）。
2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小時去掉胰酶，加6~8 ml 完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散。
3. 取出部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%以后重復傳代操作或者凍存。

八、懸浮細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵守無菌操作）
1. 懸浮細胞常規(guī)傳代操作為半量換液，分瓶傳代，即取出一半細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；也可根據(jù)細胞密度分多瓶傳代。
2. 注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。

九、半貼壁半懸浮細胞培養(yǎng)注意事項（請嚴格遵守無菌操作）
1. 若懸浮細胞較多且折光率良好，可離心收集，繼續(xù)培養(yǎng)。
2. 若有少量細胞懸浮，也可不用收集，傳代操作按常規(guī)貼壁細胞操作流程處理。
3. 若懸浮細胞較多，離心收集，原瓶中貼壁細胞按照常規(guī)規(guī)貼壁細胞操作流程進行消化、終止消化、吹打，并與之前收集的懸浮細胞混懸，分瓶培養(yǎng)。