MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞說明書

        
 
 
 
 
 
 
五、組成：

 

六、細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1. 您收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)完全融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，切勿再次低溫凍存；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將含有細(xì)胞的凍存管放入液氮中保存待用，并按指定條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
2. 請(qǐng)您在接收細(xì)胞后的4周內(nèi)及時(shí)做復(fù)蘇培養(yǎng)，以確認(rèn)細(xì)胞活力、狀態(tài)并保種。逾期恕不受理售后問題，謝謝合作！
3. BNCC凍存細(xì)胞采用優(yōu)化配比的細(xì)胞凍存液，無需離心，細(xì)胞解凍后直接將250 ul細(xì)胞懸液滴入裝有8-10 ml完全培養(yǎng)基的細(xì)胞培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。

七、貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請(qǐng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作）
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加1~2 ml 含0.25% EDTA的胰酶進(jìn)行消化（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?~2min）。
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小時(shí)去掉胰酶，加6~8 ml 完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落、吹散。
3. 取出部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細(xì)胞密度達(dá)到70-80%以后重復(fù)傳代操作或者凍存。

八、懸浮細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請(qǐng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作）
1. 懸浮細(xì)胞常規(guī)傳代操作為半量換液，分瓶傳代，即取出一半細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；也可根據(jù)細(xì)胞密度分多瓶傳代。
2. 注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細(xì)胞密度達(dá)到70-80%時(shí)重復(fù)傳代操作或者凍存。

九、半貼壁半懸浮細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)（請(qǐng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作）
1. 若懸浮細(xì)胞較多且折光率良好，可離心收集，繼續(xù)培養(yǎng)。
2. 若有少量細(xì)胞懸浮，也可不用收集，傳代操作按常規(guī)貼壁細(xì)胞操作流程處理。
3. 若懸浮細(xì)胞較多，離心收集，原瓶中貼壁細(xì)胞按照常規(guī)規(guī)貼壁細(xì)胞操作流程進(jìn)行消化、終止消化、吹打，并與之前收集的懸浮細(xì)胞混懸，分瓶培養(yǎng)。