藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF實(shí)驗(yàn)操作步驟
2017-11-28 17:05 來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF簡(jiǎn)介:
藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF是將藍(lán)色染料偶聯(lián)到高度偶聯(lián)的瓊脂糖凝膠上,具有很化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,機(jī)械強(qiáng)度高,流速快的特點(diǎn);主要是通過(guò)配基提供電子對(duì)作用與疏水作用的綜合作用與目標(biāo)蛋白結(jié)合,一種應(yīng)用很廣泛的親和色譜材料,適用于白蛋白、干擾素、α-2巨球蛋白、凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+的酶的工業(yè)化純化使用。
上海遠(yuǎn)慕生物詳細(xì)介紹藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF實(shí)驗(yàn)操作步驟,適用范圍,用途等說(shuō)明!
中文名:藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF
英文名:Blue Sepharose 6FF
供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格:25ml,100ml
基質(zhì):6% 交聯(lián)瓊脂糖凝膠
配基:藍(lán)色染料
配基密度:10μmol/mL
顆粒大小:45-165μm
最大流速:300cm/h
工作PH:3-10
清洗PH:2-13
操作溫度:室溫
保存條件:保存于20%的乙醇于+4-8°C
存儲(chǔ)條件:常溫,陰涼
用途:生化研究。純化各種需要NAD、NADP作為輔酶的的酶類(lèi)、白蛋白、凝血因子、干擾素等。
保存溫度:2~8℃
性狀:藍(lán)色液體,底部為膠體
藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF適用范圍:
藍(lán)色瓊脂糖凝膠適用可適用于白蛋白、干擾素、α2巨球蛋白、凝血因子及各種需要NAD和NADP的酶的分離純化。
藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1.藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF裝柱,1.6×20cm,柱床體積為15ml;
2.用緩沖液1平衡5-10個(gè)床體積,流速為4ml/min;
3.含牛血清白蛋白的樣品離心,用緩沖液1進(jìn)行1:1稀釋?zhuān)?.45μm濾膜過(guò)濾,上樣。流速為2ml/min;
4.用緩沖液1再洗5-10個(gè)床體積,流速為2ml/min;
5.用緩沖液2洗脫,流速為2ml/min,收集洗脫峰;
6.用純水流洗5個(gè)柱床體積,再用20%的乙醇流洗5個(gè)柱床體積,流速為4ml/min,柱子置于4~8℃環(huán)境中保存;
7.將分離純化的BSA進(jìn)行SDS-PAGE電泳分析。緩沖液組成: 緩沖液1:50mMKH2 PO4 ,pH7.0。緩沖液2:50mMKH2 PO4 ,1.5MKCl,pH7.0。
藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF實(shí)驗(yàn)操作步驟注意事項(xiàng):
1.該凝膠從冷室或冰箱中取出后最好在室溫下緩慢振搖恢復(fù)到室溫,然后再裝柱,以免產(chǎn)生氣泡影響柱效。
2.第一次使用得先用20%的乙醇洗5個(gè)柱床體積,然后再用2MNaCl洗5個(gè)柱床體積,洗去殘留的染料,再平衡使用。
3.上樣樣品必須與緩沖液1的pH、電導(dǎo)相同。
4.藍(lán)色瓊脂糖凝膠FF親和填料的再生處理方法:用0.5MNaOH含2MNaCl流洗3個(gè)床體積,最后用20%乙醇洗3個(gè)床體積即可。
5.該親和填料保存條件為20%乙醇,4~8℃。
標(biāo)簽:藍(lán)色瓊脂糖凝膠6FF,藍(lán)色瓊脂糖凝膠