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1、組成成分:
A、1×TE緩沖液:10mmol/LTris.Cl;1mmol/LEDTA,pH8.0。
B、1×TAE緩沖液:40mmol/LTris-乙酸;2mmol/LEDTA,pH8.0。
C、1×TBE緩沖液:45mmol/LTris-硼酸;1mmol/LEDTA,pH8.0。
2、用途:
A、TE緩沖液:一般用作溶解劑或保持劑,常用于溶解DNA,能穩(wěn)定儲(chǔ)存DNA。
B、TAE緩沖液:生物學(xué)中使用最廣泛的核酸電泳緩沖液,主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。
C、TBE緩沖液:生物學(xué)中常用的核酸電泳緩沖液,主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。
3、TAE和TBE緩沖液的選擇:
TAE和TBE緩沖液都可以用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳,兩者各有利弊,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況選擇不同的緩沖液。
TAE和TBE緩沖液的比較
TAE緩沖液:
成分:40mmol/LTris-乙酸;2mmol/LEDTA
優(yōu)點(diǎn):超螺旋在其中電泳時(shí)更符合實(shí)際相對(duì)分子緩沖容量小,長時(shí)間電泳(如過夜)不可選用。質(zhì)量電泳大于13kb的片段時(shí)分離效果好,可用于回收DNA片段。
缺點(diǎn):緩沖容量小,長時(shí)間電泳(如過夜)不可選用。
TBE緩沖液:
成分:45mmol/LTris-硼酸;1mmol/LEDTA
優(yōu)點(diǎn):緩沖能力強(qiáng),適合較長時(shí)間電泳,分辨率較高,電泳小于1kb的片段時(shí)分離效果好。
缺點(diǎn):緩沖液中的硼酸成分會(huì)影響DNA回收效率以及后續(xù)的酶反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。
4、注意:
TBE濃溶液長時(shí)間存放后會(huì)形成沉淀物,出現(xiàn)沉淀后應(yīng)予以廢棄。