實驗室常用細(xì)胞裂解方法介紹

細(xì)胞破碎是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù),是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進展,以前認(rèn)為很難獲得的蛋白質(zhì)現(xiàn)在可以大規(guī)模生產(chǎn)。

但是由于細(xì)菌、酵母、植物細(xì)胞壁的組成成分不同,且同類細(xì)胞結(jié)成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)也不同,所以其細(xì)胞壁的堅固程度不同。而動物細(xì)胞雖沒有細(xì)胞壁,但具有細(xì)胞膜,也需要一定的細(xì)胞破碎方法來破膜,達(dá)到提取產(chǎn)物的目的。
  一般用物理或者化學(xué)方法來使得細(xì)胞裂解

物理法：

（1）反復(fù)凍融：將細(xì)胞反復(fù)放置于-20℃冷凍以及25-30℃環(huán)境下，反復(fù)冷凍溶解10次-20次。適用于例如血細(xì)胞等大部分哺乳動物細(xì)胞。

（2）煮沸法：與凍融法相反，將細(xì)胞放置于100℃沸水煮沸5-10分鐘，適用于大部分微生物細(xì)胞。

（3）超聲法：將細(xì)胞放置于超聲破碎儀中，以一定頻率的超聲破碎細(xì)胞，適用于絕大部分微生物細(xì)胞。

（4）滲透壓法：將血細(xì)胞等細(xì)胞膜較為薄弱的細(xì)胞放置于純水等低滲溶液，細(xì)胞吸收大量水分破解。

（5）液氮法：植物細(xì)胞一般采用液氮捻磨的方法破解細(xì)胞。

化學(xué)法:

（1）強酸、強堿溶液：一般應(yīng)用0.5N NaOH溶液可以裂解絕大部分動物細(xì)胞和微生物細(xì)胞。

（2）生物酶：一般用溶菌酶、蛋白酶K等酶裂解微生物細(xì)胞。