實驗室常用細胞裂解方法介紹

細胞破碎是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù),是分離純化細胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質(zhì)現(xiàn)在可以大規(guī)模生產(chǎn)。

但是由于細菌、酵母、植物細胞壁的組成成分不同,且同類細胞結(jié)成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)也不同,所以其細胞壁的堅固程度不同。而動物細胞雖沒有細胞壁,但具有細胞膜,也需要一定的細胞破碎方法來破膜,達到提取產(chǎn)物的目的。
  一般用物理或者化學方法來使得細胞裂解

物理法：

（1）反復(fù)凍融：將細胞反復(fù)放置于-20℃冷凍以及25-30℃環(huán)境下，反復(fù)冷凍溶解10次-20次。適用于例如血細胞等大部分哺乳動物細胞。

（2）煮沸法：與凍融法相反，將細胞放置于100℃沸水煮沸5-10分鐘，適用于大部分微生物細胞。

（3）超聲法：將細胞放置于超聲破碎儀中，以一定頻率的超聲破碎細胞，適用于絕大部分微生物細胞。

（4）滲透壓法：將血細胞等細胞膜較為薄弱的細胞放置于純水等低滲溶液，細胞吸收大量水分破解。

（5）液氮法：植物細胞一般采用液氮捻磨的方法破解細胞。

化學法:

（1）強酸、強堿溶液：一般應(yīng)用0.5N NaOH溶液可以裂解絕大部分動物細胞和微生物細胞。

（2）生物酶：一般用溶菌酶、蛋白酶K等酶裂解微生物細胞。