人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒說明書

中文別名:人轉(zhuǎn)化生長因子Β2(TGFΒ2)ELISA試劑盒
英文名稱:Human transforming growth factors β2, TGFβ2 Elisa Kit
特異性：可檢測樣本中的人轉(zhuǎn)化生長因子β2，且與其類似物無明顯交叉反應(yīng)。
種屬： 人
保存溫度： 2-8℃
樣本類型： 血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清 和 其他生物液體

背景：
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)前體蛋白由19個氨基酸的信號肽、283個氨基酸的前區(qū)和112個氨基酸的成熟區(qū)組成。人TGF-β2成熟區(qū)與人TGF-β1和TGF-β3的同源性分別為71%和80%，與小鼠TGF-β2的同源性為97%。它可由各類細(xì)胞表達(dá)，包括破骨細(xì)胞、胸腺上皮細(xì)胞、角蛋白細(xì)胞、肝細(xì)胞、胃的主細(xì)胞和衛(wèi)星細(xì)胞等。TGF-β2具有顯著的種屬交叉生物活性，如人TGF-β2對小鼠細(xì)胞具有活性，而豬TGF-β2對兔細(xì)胞具有活性等。TGF-β2具有4種基本活性：是大部分類型細(xì)胞的生長抑制因子；可增強(qiáng)細(xì)胞外基質(zhì)的沉積；具有免疫抑制作用，抑制抗原遞呈細(xì)胞表達(dá)IL-12和CD40L，上調(diào)IL-10分泌；在胚胎發(fā)育期表達(dá)于離散區(qū)域，如上皮、心肌、手足的軟骨和骨骼、以及神經(jīng)系統(tǒng)，提示其具有特異性的功能。

工作原理：本試劑盒采用的是雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)（ELISA）。測定樣品中人轉(zhuǎn)化生長因子β2水平。向預(yù)先包被了抗人轉(zhuǎn)化生長因子β2抗體的酶標(biāo)孔中，加入標(biāo)準(zhǔn)品和樣本，溫育后，加入生物素標(biāo)記的抗轉(zhuǎn)化生長因子β2抗體。再與HRP標(biāo)記的鏈霉親和素結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶，然后加入顯色底物TMB，產(chǎn)生藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。最后，在450 nm處測定反應(yīng)孔樣品吸光度（OD）值，樣本中的人轉(zhuǎn)化生長因子β2濃度與OD值成正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣本中人轉(zhuǎn)化生長因子β2的濃度。

產(chǎn)品描述
試劑名稱    數(shù)量    試劑名稱    數(shù)量
96孔板(預(yù)包被)    1    96孔板覆膜    2
標(biāo)準(zhǔn)品    2    稀釋液    1×45mL
檢測溶液A    1×120μL    檢測溶液B    1×120μL
TMB底物    1×9mL    終止液    1×6mL
濃洗滌液(30×)    1×20mL    使用說明書    1

需自備的設(shè)備及試劑
450±10nm濾光片的酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)
單道或多道微量加液器及吸頭
稀釋樣品的EP管
蒸餾水或去離子水
吸水紙
盛放洗液的容器
試劑盒的儲存及有效期
未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。
使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。

穩(wěn)定性
經(jīng)測定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。

注意：
試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸，按實驗需求可分多次使用；使用后的剩余試劑盒建議在首次實驗后 1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn)，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。