革蘭氏染色與細(xì)菌抗酸染色技術(shù)操作技巧分享

　　蘭氏染色和抗酸染色都屬于細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查法，提到革蘭氏染色大家肯定都非常熟悉，但是說到抗酸染色你不一定了解。今天我們進(jìn)入細(xì)菌的世界，聊一聊細(xì)菌界的這兩大染色法：

　　革蘭氏染色（Gram stain）

　　用途：由丹麥病理學(xué)家Christain Gram于1884年創(chuàng)立，直到現(xiàn)今，革蘭氏染色法仍是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法。通過革蘭氏染色，可將細(xì)菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。

　　原理：細(xì)菌經(jīng)龍膽紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的龍膽紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌(G+)由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇脫色處理時(shí)，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會(huì)出現(xiàn)縫隙，因此，能把復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈藍(lán)紫色；而革蘭氏陰性菌(G-)因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋復(fù)合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)紅色染料復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

　　染色結(jié)果：

　　革蘭陽性菌(G+)：藍(lán)色

　　革蘭陽性菌(G+)：紅色

　　其他組織：黃色

　　細(xì)胞核：紅色

　　抗酸染色（Acid Fast Bacteria (AFB) Stain）

　　用途： 由埃利希（F.Ehrlich）1882年首創(chuàng)，并經(jīng)F.齊爾（Ziehl）改進(jìn)而創(chuàng)造出的細(xì)菌染色法，用于細(xì)菌標(biāo)本涂片或菌落涂片的染色，目前常用于對(duì)分枝桿菌屬進(jìn)行初步鑒別。

　　原理： 分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)（主要成分為分枝菌酸），包圍在肽聚糖的外面，具有抗酸性，染色時(shí)與石炭酸復(fù)紅結(jié)合牢固，能抵抗酸性乙醇的脫色作用，,因此抗酸菌能保持復(fù)紅的顏色，達(dá)到染色目的。未脫色細(xì)菌呈紅色為抗酸性細(xì)菌，脫色經(jīng)復(fù)染呈藍(lán)綠色的細(xì)菌為非抗酸性細(xì)菌。

　　染色結(jié)果：

　　抗酸菌組織：紅色

　　其他細(xì)菌及背景：淺綠色