【免疫學(xué)檢測(cè)】抗原、抗體檢測(cè)原理和應(yīng)用

免疫學(xué)檢測(cè)即根據(jù)抗原、抗體反應(yīng)的原理,利用已知的抗原檢測(cè)未知的抗體或利用已知的抗體檢測(cè)未知的抗原。由于外源性和內(nèi)源性抗原均可通過不同的抗原遞呈途徑誘導(dǎo)生物機(jī)體的免疫應(yīng)答,在生物體內(nèi)產(chǎn)生特異性和非特異性T細(xì)胞的克隆擴(kuò)增,并分泌特異性的免疫球蛋白(抗體)。由于抗體-抗原的結(jié)合具有特異性和專一性的特點(diǎn),這種檢測(cè)可以定性、定位和定量地檢測(cè)某一特異的蛋白(抗原或抗體)。

免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的用途非常廣泛,它們可用于各種疾病的診斷、療效評(píng)價(jià)及發(fā)病機(jī)制的研究。最初的免疫檢測(cè)方法是將抗原或抗體的一方或雙方在某種介質(zhì)中進(jìn)行擴(kuò)散,通過觀察抗原-抗體相遇時(shí)產(chǎn)生的沉淀反應(yīng),檢測(cè)抗原或抗體,最終達(dá)到診斷的目的。這種擴(kuò)散可以是蛋白的自然擴(kuò)散,例如環(huán)狀沉淀試驗(yàn)、單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)。

(1)單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)(single immunodiffusion test):就是在凝膠中混入抗體,制成含有抗體的凝膠板,將抗原加入凝膠板預(yù)先打好的小孔內(nèi),讓抗原從小孔向四周的凝膠自然擴(kuò)散,當(dāng)一定濃度的抗原和凝膠中的抗體相遇時(shí)便能形成免疫復(fù)合物,出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈,沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度成正比。

(2)雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)(double immunodiffusion test):一種分析鑒定抗原、抗體純度和抗原特異性的試驗(yàn)。即抗原和抗體分子在凝膠板上擴(kuò)散,二者相遇并達(dá)到最適比例時(shí)形成沉淀線。利用蛋白在不同酸堿度下帶不同電荷的特性,可以利用人為的電場(chǎng)將抗原、抗體擴(kuò)散。例如:免疫電泳試驗(yàn)和雙向凝膠電泳。