葉綠體色素的提取和分離實驗

原理

葉綠體色素是植物吸收太陽光能進(jìn)行光合作用的重要物質(zhì)，主要由葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素和葉黃素組成。從植物葉片中提取和分離色素是對其認(rèn)識和了解的前提。利用葉綠體色素能溶于有機溶劑的特性，可用丙酮提取。分離色素的方法有多種，紙層析是其中最簡便的一種。當(dāng)溶劑不斷地從層析濾紙上流過時，由于混合物中各成分在兩相（即流動相和固定相）間具有不同的分配系數(shù)，它們的移動速度不同，使樣品中的混合物得到分離。

儀器藥品

大試管 臺天平

研缽 量筒

燒杯 漏斗

軟木塞 新華濾紙

丙酮 四氯化碳

無水硫酸鈉 碳酸鈣

石英砂

操作步驟

1．稱取新鮮葉子2g，放入研缽中加丙酮5ml，少許碳酸鈣和石英砂，研磨成勻漿，再加丙酮5ml，然后以漏斗過濾之，即為色素提取液。

2．取準(zhǔn)備好的濾紙條（2×20cm），將其一端剪去兩側(cè)，中間留一長約1.5cm，寬約0.5cm的窄條。

3．用毛細(xì)管取葉綠素溶液點于窄條的上方，注意一次所點溶液不可過多，如色素過淡，用電吹風(fēng)吹干后再點1梍2次。

4．在大試管中加入四氯化碳3梍5ml及少許無水硫酸鈉。然后將濾紙條固定于軟木塞上，插入試管內(nèi)，使窄端浸入溶劑中（色素點要略高于液面，濾紙條邊緣不可碰到試管壁），蓋緊軟木塞，直立于陰暗處進(jìn)行層析。經(jīng)過0.5─1小時后，觀察分離后色素帶的分布。最上端橙黃色為胡蘿卜素，其次黃色為葉黃素，再下面藍(lán)綠色為葉綠素a，最后的黃綠色為葉綠素b。
 

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