細(xì)胞免疫熒光的詳細(xì)操作步驟

細(xì)胞免疫熒光的詳細(xì)操作步驟

1，取出細(xì)胞爬片放到35mm或60mm用過的細(xì)胞培養(yǎng)皿里，PBS洗三遍。注意有的時(shí)候作的細(xì)胞爬片可能比較小，因此夾取的時(shí)候要小心。

2，4%多聚甲醛固定20分鐘，PBS洗三遍。

3，0.2%Triton X 100通透10分鐘，PBS洗三遍。

4， 與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘，PBS洗三遍。

5.，一抗4度濕盒內(nèi)過夜，也可37度2小時(shí)，感覺前者效果好，PBS洗三遍。

6，二抗室溫2小時(shí)，或者37度1半小時(shí)，PBS洗三遍。

7，最好用DAPI染核，然后直接照熒光片。

8，蒸餾水洗掉PBS，甘油封片，指甲油封片子的四周。