一、微生物的篩選方法
1、單菌落挑取法:利用平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板法接種在固體培養(yǎng)基表面,根據(jù)目的微生物特定的菌落特征,利用單菌落挑取的方法挑選目的微生物
2、選擇培養(yǎng)法:利用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng),直接篩選目的微生物
3、鑒定培養(yǎng)法:利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征,然后篩選目的微生物
4.根據(jù)功能可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。
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培養(yǎng)基中加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
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培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽用于分離得到金黃色葡萄球菌
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以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基用于分離分解尿素的細(xì)菌
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石油是唯一碳源時(shí),可以抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng),使能夠利用石油的微生物生存,達(dá)到分離能消除石油污染的微生物的目的
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培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物
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伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌(菌落呈深紫色并帶金屬光澤)
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二、微生物的鑒別方法
1、菌落特征鑒別法:根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別
2、指示劑鑒別法:如在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種微生物后,若培養(yǎng)基變紅說(shuō)明該種微生物能夠分解尿素
3、染色鑒別法:如在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入剛果紅,培養(yǎng)某種微生物,若培養(yǎng)基中出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈,說(shuō)明該微生物能分解纖維素
三、走出微生物培養(yǎng)的4個(gè)誤區(qū)
(1)不是所有微生物培養(yǎng)基中均需加入特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。碳源、氮源、水分、無(wú)機(jī)鹽是微生物生長(zhǎng)必需的四大營(yíng)養(yǎng)
成分,有些微生物可自行合成特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而對(duì)那些合成能力有限或不能合成特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的微生物(如乳酸菌),則需在培養(yǎng)基中添加諸如維生素等物質(zhì)。
(2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中菌落的數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目“低”。這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。而顯微計(jì)數(shù)法由于不能區(qū)分死菌與活菌,故所得數(shù)值可能比實(shí)際值“偏高”。
(3)平板劃線(xiàn)法只適用于微生物的提純,不適用于微生物的計(jì)數(shù),并且在最后一次劃線(xiàn)的末端處的菌種最純。
(4)倒平板的溫度一般在50 ℃左右適宜,溫度過(guò)高會(huì)燙手,溫度過(guò)低培養(yǎng)基又會(huì)凝固。平板冷卻凝固后需倒置,防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成培養(yǎng)基污染。