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改良 Bielschowsky 神經(jīng)染色液操作步驟

2023-06-12 16:15 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
改良 Bielschowsky 神經(jīng)染色液
規(guī)格: 5×50ml
保存: 4℃ 避光,有效期3個月。
 
產(chǎn)品內(nèi)容:
名稱 規(guī)格 Storage
試劑(A): Bielschowsky銀溶液 50ml 4℃ 避光
試劑(B): 還原劑 2×125ml RT
試劑(C): Bielschowsky氨銀溶液 50ml 4℃ 避光
試劑(D): 氯化金溶液 50ml 4℃ 避光
試劑(E): 海波溶液 50ml RT
 
 
產(chǎn)品說明:
神經(jīng)組織主要是由具有長突起、能傳導(dǎo)沖動的神經(jīng)細(xì)胞組成。神經(jīng)細(xì)胞是神經(jīng)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能單位,也稱神經(jīng)元(Neuron)。神經(jīng)元之間通過突觸互相聯(lián)系。神經(jīng)元的胞突分為樹突與軸突兩種。每個神經(jīng)元有 1 至多個樹突,軸突只有一個。
神經(jīng)纖維由從神經(jīng)元發(fā)出的軸突和較長的樹突以及包裹在外的構(gòu)造一起組成。軸突中主要為神經(jīng)原纖維和少量胞漿及線粒體,沒有尼氏小體。軸突外周的構(gòu)造,有些較為復(fù)雜,外層被鞘膜包裹,稱為有髓纖維;有些比較簡單,無鞘膜被覆,稱為無髓纖維。
神經(jīng)元和神經(jīng)纖維的染色方法較多,但主要為鍍銀法。鍍銀法的基本原理是把固定后的組織或切片浸于銀溶液中,再用還原劑處理,使銀顆粒沉著于軸索的軸漿中,使之呈現(xiàn)深棕色或黑色。鍍銀后可在神經(jīng)元胞漿內(nèi)看到許多交錯成網(wǎng)的細(xì)絲,并伸入樹突及軸突之中。
Bielschowsky 銀染法是檢測神經(jīng)纖維的一個非常有用方法。它可用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的軸突、神經(jīng)纖維和老年斑的染色。該方法簡便易行,常被用于阿爾茨海默癥的染色。
 
操作步驟(僅供參考):
1、 石蠟切片厚 8~15μm,脫蠟至水洗。
2、 蒸餾水洗 1~2min。
3、 于 37℃溫箱內(nèi)入 Bielschowsky 銀溶液避光浸染 25~35 min。4、 蒸餾水洗 2~3min。
5、 用還原劑還原數(shù)秒,至切片呈現(xiàn)黃色為止。
6、 蒸餾水洗 3~5 min。
7、 用 Bielschowsky 氨銀溶液滴染 20~40s。
8、 傾去染液,直接用還原劑再次還原 1~2min,更換兩次溶液,使切片呈棕黃色。
9、 蒸餾水洗 3~5min。
10、 用氯化金溶液調(diào)色 3~5min。
11、 蒸餾水洗 1~2min。
12、 用海波溶液固定 3~5min。
13、 水洗 3~5min,然后用濾紙將切片周圍水分吸干。
14、 無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。
 
染色結(jié)果:神經(jīng)元、軸突、神經(jīng)纖維 深紫色至黑色
 
注意事項:
1、 所用的玻璃器皿要用酸洗,并用蒸餾水沖洗干凈,避免造成銀鏡反應(yīng)。
2、 浸銀染色中過程中切片要注意展平避免皺褶,以免著色不均勻。
3、 建議每染色 10-15 張切片后更換新的染色液。
4、 切片染完后,裱片時要輕拿輕放,以免弄碎切片。
5、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
 
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