細(xì)胞培養(yǎng)為何要先裂解紅細(xì)胞？

紅細(xì)胞裂解液

一、基本介紹

紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞最簡(jiǎn)便易行的方法，即用裂解液裂解紅細(xì)胞，它 既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除 方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化，淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì) 胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不 含紅細(xì)胞，可進(jìn)一步用于原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的分離和 提取等。

二、使用說明

①組織細(xì)胞樣品

1、新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個(gè)細(xì)胞懸液，離心棄去上清液。

2、從4℃冰箱中取出 ELS裂解液，按 1:3-5 的比例向細(xì)胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml 細(xì)胞壓積加入 3-5ml裂解液），輕輕吹打混勻。

3、 800-1000rpm離心 5-8 分鐘，離心棄去上層紅色清液。

4、收集沉淀部分，加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗 2-3 次。

5、如裂解不完全可重復(fù)步驟2和3。

6、重懸細(xì)胞，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如提取RNA，最好是于步驟4開始使用DEPC水配制 的溶液中進(jìn)行

紅細(xì)胞的生命周期非常短，一般只有120天，但是他繁殖的血特別快，用他的話就會(huì)特別的能體現(xiàn)細(xì)胞的分裂，然后他是所有細(xì)胞中分裂最快的所以這個(gè)細(xì)胞他是非常的有有價(jià)值的，所以對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)他非常的有用。就是它的構(gòu)造非常簡(jiǎn)單，里面沒有任何的細(xì)胞器，只有細(xì)胞膜跟蛋白質(zhì)。