實驗中細(xì)胞系的具體要求了解一下
2023-06-08 10:41 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
實驗中建立細(xì)胞系有以下要求:
1、組織來源:細(xì)胞供體所屬物種,來自人體或者動物;
個體性別、年齡;取材的器官或組織。
如系腫瘤組織,應(yīng)說明臨床和病理診斷,以及病歷號等。
2、細(xì)胞生物學(xué)檢測:
了解細(xì)胞一般和特殊的生物學(xué)性狀,如細(xì)胞一般形態(tài),特異結(jié)構(gòu),細(xì)胞生長曲線和分裂指數(shù),倍增時間,接種率等。
如為腫瘤細(xì)胞,為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性,須做軟瓊脂培養(yǎng),異體接種致瘤和對正常組織侵潤力等實驗。
3、培養(yǎng)條件和方法;應(yīng)說明細(xì)胞系(或株)適應(yīng)的生存環(huán)境,即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。
細(xì)胞株、細(xì)胞系、原代細(xì)胞的概念
細(xì)胞株(cell strain)是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)細(xì)胞中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的細(xì)胞稱為細(xì)胞株。一般認(rèn)為,細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。
細(xì)胞系(cell line)是原代細(xì)胞經(jīng)首次傳代成功后即為細(xì)胞系。泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系。由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
原代細(xì)胞(primary cell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個細(xì)胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細(xì)胞,稱為原代細(xì)胞。一般認(rèn)為,培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長、繁殖和傳代,進行細(xì)胞生命過程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問題的研究。