細(xì)菌鑒定的酶類(lèi)試驗(yàn)介紹

細(xì)菌鑒定的酶類(lèi)試驗(yàn)是細(xì)菌的生化反應(yīng)中酶類(lèi)的存在與否等生化特性，這些反應(yīng)能夠?qū)е路磻?yīng)體系的PH值變化或產(chǎn)生顯色物質(zhì)，加入合適的酸堿指示劑或顯色劑就可以反映出來(lái)。

氧化酶試驗(yàn)

氧化酶（細(xì)胞色素氧化酶）是細(xì)胞色素呼吸酶系統(tǒng)的最終呼吸酶。具有氧化酶的細(xì)菌，首先使細(xì)胞色素C氧化，再由氧化的細(xì)胞色素C使對(duì)苯二胺氧化，生成有色的醌類(lèi)化合物。

試驗(yàn)方法

1）菌落法：直接滴加氧化酶試劑于被檢菌菌落上；

2）濾紙法：取潔凈濾紙一小塊，蘸取菌少許，然后加氧化酶試劑；

3）試劑紙片法：將濾紙片浸泡于氧化酶試劑中制成試劑紙片，取菌涂于試劑紙上。

結(jié)果判讀

細(xì)菌在與試劑接觸10s內(nèi)呈深紫色，為陽(yáng)性。為保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，分別以銅綠假單胞菌和大腸埃希菌作為陽(yáng)性和陰性對(duì)照。

臨床應(yīng)用及意義

主要用于腸桿菌科細(xì)菌與假單胞菌的鑒別，前者為陰性，后者為陽(yáng)性。奈瑟菌屬、莫拉菌屬細(xì)菌也呈陽(yáng)性反應(yīng)。此外，也用于假單胞菌屬與腸桿菌科細(xì)菌的區(qū)別，前者陽(yáng)性，而后者陰性。產(chǎn)堿桿菌屬等均為陽(yáng)性。

異常結(jié)果： 奈瑟菌屬有腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9種致病菌，引起流行性腦脊髓膜炎

上呼吸道癥狀：鼻咽炎等全身感染癥狀：高熱、出血點(diǎn)或瘀血點(diǎn)，腦膜炎癥狀：頭痛、嘔吐、頸項(xiàng)強(qiáng)直;引起淋病，引起新生兒淋病性眼結(jié)膜炎。

觸酶試驗(yàn)

觸酶又稱(chēng)過(guò)氧化氫酶，具有過(guò)氧化氫酶的細(xì)菌，能催化過(guò)氧化氫成為水和原子態(tài)氧，繼而形成氧分子，出現(xiàn)氣泡。大多需氧和兼性厭氧菌均產(chǎn)生過(guò)氧化氫酶，但鏈球菌科陰性，故常用此試驗(yàn)來(lái)鑒定。分枝桿菌的鑒別則用耐熱觸酶試驗(yàn)，結(jié)核分枝桿菌為陰性，戈氏分枝桿菌和地分枝桿菌為陽(yáng)性。

試驗(yàn)方法

取潔凈玻片1張，用接種環(huán)挑取細(xì)菌，加3％的H2O2 1滴，立即觀察結(jié)果。

結(jié)果判讀

若立即出現(xiàn)大量氣泡為陽(yáng)性。無(wú)氣泡為陰性。

臨床應(yīng)用及意義

大多需氧和兼性厭氧菌均產(chǎn)生過(guò)氧化氫酶，但鏈球菌科陰性，故常用此試驗(yàn)來(lái)鑒定。此外，金氏桿菌屬的細(xì)菌也為陰性。分枝桿菌的鑒別則用耐熱觸酶試驗(yàn)，結(jié)核分枝桿菌為陰性，戈氏分枝桿菌和地分枝桿菌為陽(yáng)性。

注意事項(xiàng)

① 試驗(yàn)時(shí)應(yīng)避免接觸含鐵物質(zhì)，以免出現(xiàn)假陽(yáng)性。

② 10g/L鹽酸四甲基對(duì)苯二胺或10g/L鹽酸四甲基對(duì)苯二胺水溶液為無(wú)色溶液，在空氣中易被氧化而失效，故應(yīng)經(jīng)常更換新試劑，并盛于棕色瓶中，若試劑已變成深藍(lán)色，應(yīng)棄去不用。