怎樣才能做好血涂片的制作及染色?

要做好一張血涂片，我們應(yīng)該把它的原理，各種要求和影響因素熟記于心，還要加上適當(dāng)?shù)木毩?xí)。

血涂片的制作

一、原理：將一小滴血液均勻涂在玻片上，呈單層分布，制成薄血片。用瑞氏染液進行染色。

二、載波片的要求：制備血涂片使用的載玻片要有很好的清潔度。新的載玻片常有游離堿質(zhì)，應(yīng)用清洗液或10% 鹽酸浸泡24小時，然后再徹底清洗。用過的載玻片可放入適量肥皂水或洗滌劑的水中煮沸20分鐘，再用熱水將肥皂和血膜洗去，用自來水反復(fù)沖洗，然后擦干備用。

三、操作：

1、用毛細吸管吸取EDTA抗凝的外周血5-7UL，或者直接采集患者末梢血，將血滴滴至載玻片的一端約1CM處或整片的3/4端。有磨砂片的玻片，可在接近磨砂頭的部位來水反復(fù)沖洗，然后擦干備用。

2、左手持載玻片，右手持玻片，將推片接近血滴處，然后輕輕接觸血滴并壓在血滴上，使血液呈“￣”字型展開，充滿推片寬度。

3、將推片與載玻片形成30度夾角，用均勻的速度將血向載玻片的另一端推動。紅細胞壓積發(fā)生變化時，應(yīng)適當(dāng)?shù)恼{(diào)整推片與載玻片的角度以及推動血液是的速度。標(biāo)準(zhǔn)的血涂片應(yīng)做到頭、體、尾分明，兩邊和兩端留有空隙。

四、方法學(xué)評價:良好的血涂片是染色后血液形態(tài)學(xué)檢查的前提。薄血膜推片法用血量少、操作簡單，是應(yīng)用最廣泛的方法。某些抗凝劑可使血細胞形態(tài)發(fā)生變化，分類時應(yīng)注意鑒別。根據(jù)不同的需要（如瘧原蟲）可采用厚血涂片法，陽性檢出率高。

血涂片染色

1.瑞氏-吉姆薩混合染色能集合瑞氏染色與吉姆薩染色的優(yōu)點。

2.染色方法：標(biāo)記血涂片，將血涂片平放在染色架上，滴加A液覆蓋整個血膜，30秒-1分鐘后，滴加B液，將A、B液混勻，可用洗耳球輕吹液面，A、B液的比例為1:2，靜置水平位置染色5-10分鐘后，將載玻片拿起，輕輕晃動，使染料不再附著于血膜上。把水流調(diào)至最小，平持載玻片，與水流方向呈90度，在血膜頭部沖入，向血膜的尾端調(diào)整玻片的角度，直至染料沖干凈，沖洗干凈后的血涂片，放置在血片架上將水自然控干，或傾斜玻片等待自然干燥。

3.判斷染色結(jié)果：在正常情況下，良好的染色結(jié)果為血膜外觀為淡紫紅色；低倍鏡下，細胞分布均勻；細胞呈粉紅色，少見染色顆粒，白細胞胞質(zhì)能顯示各類細胞的特有色彩，白細胞核染成紫紅色。