【微生物檢測】培養(yǎng)基適用性操作規(guī)程

一、目的：
建立培養(yǎng)基適用性檢查操作規(guī)程，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

二、適用范圍：
本規(guī)程規(guī)定了培養(yǎng)基適用性檢查方法和操作要求，適用于微生物實(shí)驗(yàn)室計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基、控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查。

三、內(nèi)容：

1、簡述
1.1 培養(yǎng)基適用性檢查試驗(yàn)可用于確定實(shí)驗(yàn)室所使用培養(yǎng)基(包括購置的不同批號的成品培養(yǎng)基、不同批號的脫水培養(yǎng)基、按處方自行配制培養(yǎng)基所用不同批次的原材料等)、制備程序（包括水質(zhì)控制、配制方法、滅菌程序等）、保存條件（溫度、濕度、時間及盛裝培養(yǎng)基的容器條件等）等是否滿足微生物限度檢查要求。
1.2 計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查包括需氧菌、霉菌及酵母菌總數(shù)計(jì)數(shù)。
1.3 控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查包括促生長能力、抑制能力及指示特性的檢查。

2 計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查
微生物限度檢查中計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基有5種，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、R2A瓊脂培養(yǎng)基、平板計(jì)數(shù)培養(yǎng)基。

2.1 培養(yǎng)基及配制
2.1.1 培養(yǎng)基：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、胰酪大豆胨瓊脂對照培養(yǎng)基；沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂對照培養(yǎng)基；R2A瓊脂培養(yǎng)基、R2A瓊脂對照培養(yǎng)基；平板計(jì)數(shù)培養(yǎng)基。

2.1.2 配制：照《培養(yǎng)基配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》配制。
2.2 試劑及稀釋劑配制
2.2.1 試劑：pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液、聚山梨酯80、氯化鈉。
2.2.2 稀釋劑配制
pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液：稱取pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液14.63g,加水1000mL溶解，分裝，滅菌（121℃、15min）。
0.05％（mL/mL）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液：取已經(jīng)滅菌好的聚山梨酯80（1mL），加入pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，搖勻，即得。
0.9％無菌氯化鈉溶液：稱取氯化鈉9.0g，加水溶解使成1000mL，分裝，滅菌（121℃、15min）。

3 試劑及消毒液配制
3.1 試劑
新潔爾滅溶液、84消毒液、苯酚、75％醫(yī)用消毒酒精。
3.2 消毒液配制
3.2.1 84消毒液：取84消毒液1ml，加水60ml(1：60)，搖勻即得。
3.2.2 0.1％新潔爾滅溶液：取新潔爾滅溶液20.4ml，加水至1000ml，搖勻，即得。
3.2.3 5％的苯酚溶液：稱取苯酚5g，加水至100ml,搖勻，即得。
3.2.4 75％酒精棉球：取滅菌脫脂棉撕成小塊并揉捏成團(tuán)，置于廣口瓶內(nèi)，加入75% 醫(yī)用消毒酒精，充分浸潤，即得。

4 試驗(yàn)用菌株及菌液制備
4.1 試驗(yàn)用菌株
金黃se葡萄球菌（Staphylococcus aureus）［CMCC(B)26003］
銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）［CMCC(B)10104］
枯草芽孢桿菌（Bacillus s aureus）［CMCC(B)63501］
白色念珠菌（Candida albicans）［CMCC(F)98001］
黑曲霉（Aspergillus niger）［CMCC(F)98003］

4.2 菌液制備
4.2.1 儀器與用具
儀器：生化培養(yǎng)箱（30～35℃）、霉菌培養(yǎng)箱（20～25℃）、恒溫水浴鍋。
用具：酒精燈、打火機(jī)、吸耳球、試管架、大試管（20×200mm、15×200mm）、錐形瓶、硅膠塞、刻度吸管（1mL、2mL、5mL/10mL）、吸管桶、接種環(huán)、培養(yǎng)皿（90mm）、不銹鋼培養(yǎng)皿桶、不銹鋼吸管桶、玻璃專用筆。

5 菌液制備方法
5.1 金黃se葡萄球菌菌液制備方法
5.1.1 用無菌接種取金黃se葡萄球菌斜面中底部菌落一環(huán)，在裝有pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液10mL的試管內(nèi)壁上輕輕摩擦，使環(huán)上的菌苔全部洗于溶液中，振搖混勻。
5.1.2 用1ml無菌吸管吸取上述均勻菌液0.1mL加入裝有9.9mL pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的試管中，混勻，作為10-1級。
5.1.3 以此類推，10倍遞增稀釋至每1ml含菌數(shù)不大于100cfu的菌懸液，備用。
5.2 枯草芽孢桿菌菌液制備方法
照金黃se葡萄球菌菌液制備方法同法操作。
5.3銅綠假單胞菌菌液制備方法
照金黃se葡萄球菌菌液制備方法同法操作。
5.4 白色念珠菌菌液制備方法。
5.4.1 用無菌接種取白色念珠菌斜面中底部菌落一環(huán)，在裝有pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液10ml的試管內(nèi)壁上輕輕摩擦，使環(huán)上的菌苔全部洗于溶液中，振搖混勻。
5.4.2 用1ml無菌吸管吸取上述均勻菌液0.1ml加入裝有9.9ml pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的試管中，混勻，作為10-1級。
5.4.3 以此類推，10倍遞增稀釋至每1ml含菌數(shù)不大于100cfu的菌懸液，備用。
5.5 黑曲霉液制備方法
5.5.1 取黑曲霉的斜面一支，加入20ml含0.05％（ml/ml）聚山梨酯80的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液于上述斜面培養(yǎng)物中，將孢子洗脫。
5.5.2 用管口帶有薄的無菌棉花的無菌吸管吸出全部孢子懸液，裝入另外一支無菌試管中，混勻，作為原液。
5.5.3 用1ml無菌吸管從試管中吸取0.1ml至另一支裝有9.9mlpH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的試管中，混勻，作為10-1級。
5.5.4 以此類推，10倍遞增稀釋至每1ml含菌數(shù)不大于100cfu的孢子懸液，備用。

5.6 注意事項(xiàng)
5.6.1 每一稀釋級，均需制備2個菌數(shù)計(jì)數(shù)平皿。（每一稀釋級取2個無菌平皿，每皿接種1ml菌液，銅綠假單胞菌、金黃se葡萄球菌、枯草芽孢桿菌傾注胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固后于30～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18～24h，計(jì)數(shù)；白色念珠菌、黑曲霉傾注沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中，混勻，凝固后于20～25℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)96h，計(jì)數(shù)。
5.6.2 每遞增一稀釋級，必須另換一支吸管。
5.6.3 稀釋時，吸管插入上一級試管內(nèi)不低于液面2.5cm，反復(fù)吸吹數(shù)次。
5.6.4 吸液時，應(yīng)先吸至高于吸管刻度上部少許，然后提起吸管，貼于試管內(nèi)壁調(diào)整液量至刻度，吸管移至下一稀釋試管的內(nèi)壁近液面處（切勿接觸液面）緩慢地放出全部試液。
5.6.5 所用稀釋菌液吸管均需放入裝有5％苯酚溶液的消毒缸內(nèi)，24小時后才能洗滌。
5.6.6 菌懸液制備后，若在室溫下放置應(yīng)在2h內(nèi)使用，若在2～8℃冰箱保存的菌懸液可以在24h內(nèi)使用。黑曲霉孢子懸液可在2～8℃冰箱保存，在驗(yàn)證過的貯存期內(nèi)使用。

6 計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基的適用性檢查
6.1 實(shí)驗(yàn)操作
6.1.1 胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基

接種方法
分別接種不大于100cfu的金黃se葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌懸液于無菌平皿中，傾注約20ml胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個平板，輕輕搖勻。用相應(yīng)的對照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。

適用性檢查
將接種金黃se葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)皿、對照培養(yǎng)皿于30～35℃培養(yǎng)不超過3天；將接種白色念珠菌、黑曲霉的培養(yǎng)皿、對照培養(yǎng)皿于20～25℃培養(yǎng)不超過5天。

6.1.2 沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基

接種方法
分別接種不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉的菌懸液于無菌平皿中，傾注約20ml沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個平板，輕輕搖勻。用相應(yīng)的對照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。

適用性檢查
將接種白色念珠菌、黑曲霉培養(yǎng)皿、對照培養(yǎng)皿于20～25℃培養(yǎng)不大于5天。

6.1.3 R2A瓊脂培養(yǎng)基

接種方法
分別接種不大于100cfu的銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的菌懸液于無菌平皿中，傾注約20mlR2A瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個平板，輕輕搖勻。用相應(yīng)的對照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。

適用性檢查
將接種銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)皿、對照培養(yǎng)皿于30～35℃培養(yǎng)不大于3天。

6.1.5 平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基

接種方法
分別接種不大于100cfu的金黃se葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌懸液于無菌平皿中，傾注約15ml該培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個平板，輕輕搖勻。用相應(yīng)的對照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。

適用性檢查
將接種金黃se葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)皿、對照培養(yǎng)皿于30～35℃培養(yǎng)不超過3天；將接種白色念珠菌、黑曲霉的培養(yǎng)皿、對照培養(yǎng)皿于30～35℃培養(yǎng)不超過5天

6.2 觀察與計(jì)算
觀察被檢培養(yǎng)基上銅綠假單胞菌、金黃se葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌落形態(tài)、大小與對照培養(yǎng)基上銅綠假單胞菌、金黃se葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌落形態(tài)、大小是否一致。
依次計(jì)算被檢培養(yǎng)基上銅綠假單胞菌、金黃se葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上銅綠假單胞菌、金黃se葡萄球菌、枯草芽孢桿、白色念珠菌、黑曲霉的菌落平均數(shù)的比值。

6.3 結(jié)果與判斷
若被檢固體上的菌落數(shù)平均數(shù)與對照培養(yǎng)基菌落數(shù)平均數(shù)的比值應(yīng)在0.5～2范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小應(yīng)與對照培養(yǎng)基上的菌落一致，各菌適用性檢查符合規(guī)定。
若被檢固體上的菌落數(shù)平均數(shù)與對照培養(yǎng)基菌落數(shù)平均數(shù)的比值低于0.5～2范圍，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落不一致，則判斷該培養(yǎng)基的適用性查不符合規(guī)定。

7 控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查
控制菌檢查用培養(yǎng)基有液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。

7.1 培養(yǎng)基及制備

培養(yǎng)基：脫水培養(yǎng)基、對照用培養(yǎng)基。
制備：照培養(yǎng)基配制規(guī)程新鮮配制。

7.2 試驗(yàn)用菌株及菌液制備

試驗(yàn)用菌株
大腸埃希菌（Escherichia coli）［CMCC(B)44102］
金黃se葡萄球菌（Staphylococcus aureus）［CMCC(B)26003］
枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）[CMCCB(B)63501]
銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）［CMCC(B)10104］
沙門菌（Salmonella paratyphi B）［CMCC(B)50094］
白色念珠菌（Candida albicans）［CMCC(F)98001］

7.3 控制菌檢查用培養(yǎng)基需要測試的能力及判斷指標(biāo)

7.3.1 液體培養(yǎng)基

促生長能力檢查
取不大于100CFU的試驗(yàn)菌分別接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃）或（42～44℃）及最短培養(yǎng)基時間下培養(yǎng)。與對照培養(yǎng)基比較，被檢培養(yǎng)基中試驗(yàn)菌應(yīng)生長良好，表現(xiàn)為液體培養(yǎng)基變渾濁。

指示特性檢查
取不大于100CFU的試驗(yàn)菌分別接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃）或（42～44℃）及最短培養(yǎng)基時間下培養(yǎng)。與對照培養(yǎng)基管比較，被檢培養(yǎng)基中試驗(yàn)菌生長情況/指示劑反映情況應(yīng)與對照培養(yǎng)基一致。

抑制能力檢查
取不大于100CFU的試驗(yàn)菌分別接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃）或（42～44℃）及最長培養(yǎng)基時間下培養(yǎng)，試驗(yàn)菌應(yīng)不得生長。

7.3.2 固體培養(yǎng)基

促生長能力檢查
取試驗(yàn)菌液（含菌數(shù)不大于100CFU）分別接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃或（42～44℃））及最短培養(yǎng)基時間下培養(yǎng)。與對照培養(yǎng)基比較，被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基上生長的菌落大小、形態(tài)特征應(yīng)一致。

指示特性檢查
取試驗(yàn)菌液（含菌數(shù)不大于100CFU）分別接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃）或（42～44℃）及最短培養(yǎng)基時間下培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基上試驗(yàn)菌的菌落形態(tài)特征、菌落顏色及指示劑反應(yīng)情況應(yīng)與對照培養(yǎng)基一致。

抑制能力檢查
取試驗(yàn)菌液（含菌數(shù)不少于100CFU）分別接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度（30～35℃）或（42～44℃）及最長培養(yǎng)基時間下培養(yǎng)，試驗(yàn)菌應(yīng)不得生長。

7.4 培養(yǎng)基能力測試列表
控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查項(xiàng)目、菌株及判斷指標(biāo)

培養(yǎng)基    測試菌株    測試特性    測試指標(biāo)
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基    銅綠假單胞菌    促生長能力    渾濁
金黃se葡萄球菌    促生長能力    渾濁
枯草芽孢桿菌    促生長能力    渾濁
沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基    白色念珠菌    促生長能力    渾濁
RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基    沙門菌    促生長能力    渾濁
金黃se葡萄球菌    抑制能力    不得生長
麥康凱液體培養(yǎng)基    大腸埃希菌    促生長能力    渾濁
金黃se葡萄球菌    抑制能力    不得生長
麥康凱瓊脂培養(yǎng)基    大腸埃希菌    促生長能力+指示特性    大小顏色形態(tài)同對照
木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基    沙門菌    促生長能力+指示能力    大小顏色形態(tài)同對照
三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基    沙門菌    指示能力    大小顏色形態(tài)、指示劑反應(yīng)同對照
甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基    金黃se葡萄球菌    促生長能力+指示特性    大小顏色形態(tài)同對照
大腸埃希菌    抑制能力    不得生長
溴化十六烷基三甲銨瓊脂    銅綠假單胞菌    促生長能力    大小顏色形態(tài)同對照
大腸埃希菌    抑制能力    不得生長
腸道增菌液體培養(yǎng)基    大腸埃希菌    促生長能力    渾濁
銅綠假單胞菌    促生長能力    渾濁
金黃se葡萄球菌    抑制能力    不得生長
念珠菌顯色培養(yǎng)基    白色念珠菌    促生長能力+指示能力    大小顏色形態(tài)、指示劑同對照
大腸埃希菌    抑制能力    不得生長
MUG培養(yǎng)基    大腸埃希菌    促生長能力+指示能力    大小顏色形態(tài)、指示劑同對照

7.5 實(shí)驗(yàn)操作

7.5.1 胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基

促生長能力檢查

接種方法：分別接種金黃se葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的菌懸液于該培養(yǎng)基中，接種量不大于100cfu，搖勻，培養(yǎng)。用相應(yīng)的對照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。

適用性檢查：30～35℃培養(yǎng)不超過3天。

7.5.2 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基

促生長能力檢查

接種方法：接種白色念珠菌于該培養(yǎng)基中，接種量不大于100cfu，搖勻，培養(yǎng)。用相應(yīng)的對照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)。

適用性檢查：20～25℃培養(yǎng)不超過3天。

7.5.3 RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基

促生長能力檢查

接種方法：分別接種不大于100cfu的沙門菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，與對照培養(yǎng)基管比較。

抑制能力檢查

接種方法：分別接種不少于100cfu的金黃se葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基管

比較。

7.5.4 麥康凱液體培養(yǎng)基適用性檢查

促生長能力檢查

接種方法：分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。

適用性檢查：在42～44℃條件下培養(yǎng)18～24h，與對照培養(yǎng)基管比較。

抑制能力檢查

接種方法：分別接種不少于100cfu的金黃se葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基

中。

適用性檢查：在42～44℃條件下培養(yǎng)24h，并將被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基管比較。

7.5.5 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查

促生長能力+指示特性的檢查

接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h。

7.5.6 木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基

促生長能力+指示特性的檢查

接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的沙門菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h。

7.5.7 三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基、

指示能力

接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的沙門菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基高層斜面上，便進(jìn)行穿刺。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h。

7.5.8 甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基

促生長能力+指示特性的檢查

接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的金黃se葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h。

抑制能力檢查

接種方法：用涂布法分別接種不少于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基比較。

7.5.9 溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基

促生長能力檢查

接種方法：用涂布法接種不大于100cfu的銅綠假單胞菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)

基平板上。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，與對照培養(yǎng)基比較。

抑制能力檢查

接種方法：用涂布法分別接種不少于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基比較。

7.5.10 腸道菌增菌液體培養(yǎng)

促生長能力檢查

接種方法：分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌、銅綠假單胞菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，與對照培養(yǎng)基管比較。

抑制能力檢查

接種方法：分別接種不少于100cfu的金黃se葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基管比較。

7.5.12 平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基

促生長能力檢查

接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培

養(yǎng)基平板上。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基比較。

抑制能力檢查

接種方法：用涂布法分別接種不少于100cfu的金黃se葡萄球菌、枯草芽孢桿菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基比較。

7.5.13 念珠菌顯色培養(yǎng)基

促生長能力檢查

接種方法：用涂布法分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培

養(yǎng)基平板上。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基比較。

抑制能力檢查

接種方法：用涂布法分別接種不少于100cfu的金黃se葡萄球菌、枯草芽孢桿菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h，并將被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基比較。

7.5.14 MUG培養(yǎng)基

促生長能力+指示特性的檢查

接種方法：分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板中。

適用性檢查：在30～35℃條件下培養(yǎng)18～24h。

8 注意事項(xiàng)

8.1 培養(yǎng)基的配制方法和滅菌程序發(fā)生變更時，應(yīng)再次對培養(yǎng)基進(jìn)行適用性檢查。

8.2 培養(yǎng)基批號發(fā)生變更時，應(yīng)再次對培養(yǎng)基進(jìn)行適用性檢查。

8.3 培養(yǎng)基供應(yīng)商發(fā)生變更時，應(yīng)再次對培養(yǎng)基進(jìn)行適用性檢查。

9 記錄

每一次進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查后在《培養(yǎng)基適應(yīng)性驗(yàn)證記錄》上記錄。