薄層層析法的簡介和制備過程

一、簡介

薄層層析法以吸附層析使用最為普遍。常用的吸附劑為硅膠、氧化鋁等。薄層層析和其他層析法一樣，除吸附法外，也可進(jìn)行分配、離子交換、分子排阻等機理的層析，即將鋪制薄層的材料相應(yīng)換為涂以固定相的載體、離子交換劑、凝膠等，其操作與吸附法基本相同。

二、過程

制板

鋪制薄層板時，要求基底板潔凈平整，可用干法或濕法鋪制?，F(xiàn)常用濕法制板，即將吸附劑和粘合劑（如燒石膏）按一定比例混合，加入適量水調(diào)勻，用涂布器將此勻漿緩慢地移過基底板，放置晾干，再經(jīng)適當(dāng)烘烤活化后即可使用。如不加粘合劑和水，直接將吸附劑均勻地鋪成薄層，則為干法制板。現(xiàn)在市場上已有各種制好的薄層板出售，統(tǒng)稱預(yù)制板。

展開

有多種方式，以上行法最為常用。將薄層板垂直或傾斜放置，將展開溶劑加于低部，使之自下向上移動。下行法則為用濾紙將溶劑引至薄層上端，使其自上向下流動。平行展開時，將板平放，溶劑被吸上至薄層板點有樣品的一端,進(jìn)行展開。使用圓形薄層板時,將樣品點在圓心附近，使溶劑自圓心向圓周方向移動，稱為環(huán)形展開或徑向展開；將樣品點在圓周位置，使溶劑自圓周向圓心移動的為向心展開，適用于f值大的組分的分離。將點樣品處附近的吸附劑刮去，使溶劑只能通過樣品點附近的較窄部分前進(jìn)展開，因而溶劑前緣呈弧形的展開方式，也稱徑向展開，這種方式對較難分離的組分可能效果好些。

展開一次后取出薄層板使溶劑揮發(fā)，再用同一溶劑或換用其他溶劑再次沿此方向展開的稱多次展開。將樣品點在方形薄層板的一角，先沿著一個方向展開，然后將板轉(zhuǎn)動90°，再沿著另一方向展開的為雙向展開。多次展開和雙向展開都可加強分離效果。