遠(yuǎn)慕分享：動(dòng)植物細(xì)胞大量培養(yǎng)的培養(yǎng)方法

大量培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的方法可分為兩種：

①懸浮培養(yǎng)，淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等能在液體培養(yǎng)基中懸浮生長(zhǎng)。懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)，工業(yè)放大容易，成本低，不易受污染，可在帶螺旋槳或平槳攪拌的通用發(fā)酵罐中進(jìn)行。

②大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞需要附著在一定的固定表面上才能增殖，因此稱單層培養(yǎng)。單層培養(yǎng)的突出問(wèn)題是提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的表面積。迄今為止應(yīng)用最廣泛的是滾瓶法,滾瓶是平放的玻璃瓶，內(nèi)盛培養(yǎng)基，細(xì)胞在其內(nèi)壁上附著生長(zhǎng)，隨著瓶子滾動(dòng)細(xì)胞間歇地接觸空氣和培養(yǎng)基。此外，最有效地提供比表面積（表面積/培養(yǎng)基體積）的是微珠法。微珠的直徑為40～250μm,當(dāng)1mg微珠懸浮在1ml培養(yǎng)基上時(shí)，能提供的表面積大于5cm2。另一種能提供較大的比表面積的載體為中空纖維,一般結(jié)構(gòu)是把纖維管束裝置在圓筒內(nèi),培養(yǎng)基一般在管間流動(dòng)，細(xì)胞在管內(nèi)外壁表面上生長(zhǎng)，氣體可通過(guò)中空纖維管擴(kuò)散至培養(yǎng)基中。

如何判斷一種細(xì)胞的生存狀態(tài)好壞

貼壁細(xì)胞在生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，細(xì)胞均質(zhì)而透明，細(xì)胞內(nèi)顆粒少，看不到空泡，細(xì)胞邊緣清楚，培養(yǎng)基內(nèi)看不到懸浮的細(xì)胞和碎片，培養(yǎng)液清澈透明。