【核酸染料選擇】遠(yuǎn)慕教您選擇符合實驗要求的核酸染料

核酸染料是一種靈敏、穩(wěn)定和相對安全的熒光核酸染色試劑，是生物實驗中不可或缺的一分子，尤其是在核酸檢測相關(guān)試驗中，所以核酸染料對于分子生物學(xué)相關(guān)專業(yè)的學(xué)生來說并不陌生，該如何選擇適合自己使用的核酸染料呢？以下從幾個方面來說明： 1、安全性：如果選擇EB替代染料，那么染料的安全性就是一個非常重要的指標(biāo)。安全性評估主要的檢測有Ames測試、細(xì)胞滲透性實驗、染色體畸變和正向突變分析、口服毒性分析等。在安全性方面，具有較多檢測項目和機(jī)構(gòu)出具檢測報告的核酸染料，安全性可能會更高；另外在一些報道或?qū)Ρ葦?shù)據(jù)中，我們也可根據(jù)它們可能的原料來判斷它們的安全性。

2、 穩(wěn)定性：核酸染料的穩(wěn)定性和在各種條件下的染色效果，會直接影響觀察到的染色結(jié)果。

3、靈敏度：幾乎所有的EB替代染料都其染料的靈敏度至少不低于EB，甚至高于EB，具體到試驗內(nèi)容上，只要不是有特殊的需求，一般都能滿足。

4、遷移率：由于核酸染料最終都會結(jié)合到DNA上，才能通過染料從而對DNA進(jìn)行分析，這也就意味著如果采用點染法或膠染法進(jìn)行核酸檢測時，根據(jù)使用的染料不同，核酸染料或多或少會對核酸的遷移率甚至帶型產(chǎn)生影響。

核酸染料說明書

產(chǎn)品介紹：

GoldView 是一種可代替溴化乙錠（EB）的新型DNA染料，其靈敏度與EB相當(dāng)，使用方法與之完全相同。在紫外燈下雙鏈DNA呈現(xiàn)綠色熒光。通過小鼠皮下注射實驗，尚未發(fā)現(xiàn)GoldView有致癌作用；而溴化乙錠（EB）是一種強(qiáng)致癌劑，因此用GoldView代替EB不失為一種明智的選擇。

● 儲存條件：

室溫貯存一年。

● 實驗操作步驟：

100ml溶膠液在微波爐中融化，冷卻至60℃左右（不燙手）后加入10μl GoldView，輕輕搖勻后到膠，待膠完全凝固后上樣電泳，電泳完畢在紫光燈下觀察。

● 注意事項:

1. 膠厚度不要超過0.5cm，膠太厚會影響檢測的靈敏度。

2. GoldView在pH 3.6-7.0之間能更好地與核酸結(jié)合，因此電泳時最好使用新鮮的電泳緩沖液。

3. 由于GoldView染色后DNA產(chǎn)生綠色熒光，因此不適于用一般單色膠卷拍照，可以使用凝膠成像系統(tǒng)保存圖象。

4. GoldView特別適合于大片段DNA的檢測（大于1kb的片段，檢測靈敏度與EB相當(dāng)）；當(dāng)DNA片段小于1kb時，檢測靈敏度低于EB，特別是低于500bp的片段，GoldView可能亮度很弱或檢測不到。

5. 雖然尚未發(fā)現(xiàn)GoldView有致癌作用，但由于GoldView溶液酸性較強(qiáng)，因此對皮膚、眼睛會有一定的刺激，操作時應(yīng)戴手套。