培養(yǎng)皿高壓蒸汽滅菌的方法教程

培養(yǎng)皿最初由在德國生物學家羅伯特·科赫手下工作的細菌學家朱利斯·理查德·佩特里于1887年設計，故又稱為“佩特里皿”。培養(yǎng)皿質地脆弱、易碎，故在清洗及拿放時應小心謹慎、輕拿輕放。使用完畢的培養(yǎng)皿比較好及時清洗干凈，存放在安全、固定的位置，防止損壞、摔壞。 一、培養(yǎng)皿如何滅菌

1、加水：將高壓蒸汽滅菌鍋的內層鍋取出，再往外層鍋中加入適量的水，比較好水位是使水的平面與鍋內三角擱架相平。

2、裝鍋：放回內層鍋，并將培養(yǎng)皿放入鍋內。

3、加蓋：將鍋蓋上用于排氣的軟管插入到內層鍋的排氣槽中。再以兩兩相對的方式同時扭緊相對應的兩個螺栓，使螺栓的松緊一致，勿使漏氣。

4、加熱與排氣：打開放氣閥，然后接通電源開始進行加熱，直到鍋內的水沸騰并且有大量的水蒸汽從放氣閥冒出時，維持3-5分鐘使鍋內的冷空氣全部排出。等到冷空氣完全排盡以后，再將放氣閥關閉，讓滅菌鍋內的溫度隨著蒸汽壓力的增加而逐漸上升。

5、保溫保壓：當鍋內壓力升到所需壓力值之后，控制熱源，維持所需壓力值直到所需時間。

6、出鍋：滅菌所需的時間到后，關閉滅菌鍋電源，等待鍋內的溫度自然下降，直到壓力表的數(shù)值降到"0"之后，才可以將滅菌鍋的放氣閥打開，將螺栓鈕松并打開滅菌鍋的蓋子，取出培養(yǎng)皿。

7、保養(yǎng)：滅菌完畢后，將滅菌鍋內剩下的水倒出，保持鍋的內壁及內膽干燥，并將滅菌鍋的鍋蓋蓋好。

二、培養(yǎng)皿滅菌溫度與時間

高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在愛制備過程中混入各種雜菌，分裝后應立即滅菌，至少應在24h內完成滅菌工作。滅菌時一般是在0.105MPa壓力下，溫度121℃時，滅菌15~30min即可。

三、培養(yǎng)皿滅菌為什么要用報紙包裹

在制作培養(yǎng)基時，用報紙包裹培養(yǎng)皿，主要是保護培養(yǎng)皿不受損傷，因為制作時會出現(xiàn)一些情況，所以要用舊報紙包裹培養(yǎng)皿也不會，在后加入高壓蒸汽滅菌鍋。