凝膠層析分離物質(zhì),有什么優(yōu)缺點(diǎn)?
2023-02-16 11:38 來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
1.凝膠層析操作簡(jiǎn)便,所需設(shè)備簡(jiǎn)單。有時(shí)只要有一根層析柱便可進(jìn)行工作。分離介質(zhì)—凝膠完全不需要像離子交換劑那樣復(fù)雜的再生過(guò)程便可重復(fù)使用。
2.分離效果較好,重復(fù)性高。最突出的是樣品回收率高,接近100%。
3.分離條件緩和。凝膠骨架親水,分離過(guò)程又不涉及化學(xué)鍵的變化,所以對(duì)分離物的活性沒有不良影響。
4.應(yīng)用廣泛。適用于各種生化物質(zhì),如肽類、激素、蛋白質(zhì)、多糖、核酸的分離純化、脫鹽、濃縮以及分析測(cè)定等。分離的分子量范圍也很寬,如SephadexG類為102~105d;Sepharose類為105~108d。
5.分辨率不高,分離操作較慢。由于凝膠層析是以物質(zhì)分子量的不同作為分離依據(jù)的,分子量的差異僅表現(xiàn)在流速的差異上,所以分離時(shí)流速必須嚴(yán)格把握。因而分離操作一般較慢。而且對(duì)于分子量相差不多的物質(zhì)難以達(dá)到很好的分離。此外,凝膠層析要求樣品粘度不宜太高。凝膠顆粒有時(shí)還有非特異吸附現(xiàn)象。