細胞因子中全血的標本處理方法

細胞因子中全血的標本處理方法分析：我們針對全血：使用肝素鈉抗凝的真空采血管采血，不易采用肝素鋰、EDTA和ACD抗凝劑，血樣在8小時內(nèi)分析，超過8小時會導(dǎo)致活性的損失，一般細胞因子陽性細胞會減少5%。如不能在8小時之內(nèi)檢測，應(yīng)將真空采血管水平室溫放置。

自身血漿中外周血單個核細胞（PBMCs）：使用肝素鈉抗凝的采血后，分離PBMCs，24小時內(nèi)分析。

組織培養(yǎng)基中的外周血單個核細胞（PBMCs）：用Ficoll分離PBMCs，將細胞重懸于含10%熱滅活胎牛血清（FBS）的RPMI－1640培養(yǎng)基中，調(diào)節(jié)細胞濃度為2×106細胞/ml。調(diào)節(jié)細胞濃度2×106細胞/mL于新鮮培養(yǎng)基中。

冰凍全血與PBMCs：使用1×紅細胞裂解液處理活化的外周血或者PBMCs，用PBS漂洗，并用含1%的BSA及10%的DMSO的PBS重懸，－70℃凍存。溶化后細胞置于染色管中，加上2～3mL的洗液，離心5分鐘后，用破膜劑對細胞進行破膜和染色。