緩沖溶液在實驗中起到的作用

緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時抵抗pH改變的溶液.PH緩沖系統(tǒng)對維持生物的正常pH值,正常生理環(huán)境起重要作用.多數(shù)細(xì)胞僅能在很窄的pH范圍內(nèi)進(jìn)行活動,而且需要有緩沖體系來抵抗在代謝過程中出現(xiàn)的pH變化.在生物體中有三種主要的pH緩沖體系,它們時蛋白質(zhì)、重碳酸鹽緩沖體系.每種緩沖體系所占的分量在各類細(xì)胞和器官中是不同的. 在生化研究工作中,常常要用到緩沖溶液來維持實驗體系的酸堿度.研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到我們工作的成效.如果提取酶實驗體系的pH值變化或變化過大,會使酶活性下降甚至完全失活.所以我們要學(xué)會配制緩沖溶液.

由弱酸及其鹽組合一起使具有緩沖作用.生化實驗室常常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羥甲基氨基甲烷）等系統(tǒng),在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因為有時影響實驗結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值,而是緩沖液中的某種離子.如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產(chǎn)生不需要的反應(yīng).

硼酸鹽：硼酸鹽與許多化合物形成復(fù)鹽、如蔗糖.

檸檬酸鹽：檸檬酸鹽離子容易與鈣結(jié)合,所以存在有鈣離子的情況下不能使用.

磷酸鹽：在有些實驗,它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物,重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉淀出來.而且它在pH7.5以上時緩沖能力很小.

三羥甲基氨基甲烷：它可以和重金屬一起作用,但在有些系統(tǒng)中也起抑止的作用.其主要缺點時溫度效應(yīng).這點往往被忽視,在室溫pH是7.8的Tris一緩沖液,在4℃時是8.4,在37℃時是7.4,因此,4℃配制的緩沖液拿到37℃測量時,其氫離子濃度就增加了10倍.而且它在pH7.5以下,緩沖能力很差.