超純水（UPW)的制備和滅菌

儀器、耗材
有刻度的玻璃硼硅酸鹽或消毒的塑料螺口瓶子
螺旋蓋
試紙
膠帶標(biāo)簽
純水設(shè)備
消毒鍋
日記本

實驗步驟
1.在瓶子上標(biāo)明日期、容量和批號。

2.經(jīng)過過夜循環(huán)后的第二天早晨，從純水器中放出約50ml水，分別用相應(yīng)的儀器測定傳導(dǎo)率（或電阻）和總有機碳（TOC）含量，記錄在日記本上。

3.如果水的質(zhì)量達到限定的標(biāo)準(zhǔn)（在25°C時，水的電阻≥10MΩ/cm，TOC≤10μg/L)，就直接收集至標(biāo)注好的瓶子內(nèi)。

4.灌至一定的體積，例如，如果用于稀釋10倍濃縮培養(yǎng)基，就分裝成430~450ml，如果要用于滅菌，就留出10%的空間。

5.將滅菌指示器放人一個瓶子（消毒之后檢査，而后丟棄這個瓶子）。

6.用螺口蓋將瓶子密封，如果使用堿性玻璃，即有瓶子可能破裂，就將蓋子松開。

7.將瓶子擺放在消毒鍋內(nèi)，放有消毒指示器的瓶子放置在中間。

8.關(guān)上消毒鍋，檢査設(shè)置：121°C，100kPa(15lb/in2)，以后真空之后（postvacdeselected）運行20min。

9.開啟滅菌程序。

10.在循環(huán)完成之后，檢査打印出的記錄，確認執(zhí)行的是正確的滅菌過程，記錄在本上。

11.放置，冷卻至50°C以下。

12.打開消毒鍋取瓶子，如果在高壓滅菌過程中瓶蓋松了，就在瓶子的溫度降到室溫時將蓋子擰緊。檢查滅菌指示器，確認滅菌條件已經(jīng)達到，記錄在日記本中。

13.將瓶子于室溫短期存放。

14.根據(jù)需要補充至培養(yǎng)室備用，通過檢查滅菌指示膠帶來確認瓶子是否已經(jīng)經(jīng)過滅菌處理。

注意事項

如果消毒過程中瓶蓋被打開了，在瓶子仍然是熱的時候?qū)⑸w子擰上可能會使某些瓶蓋內(nèi)的襯里在瓶子冷卻或瓶內(nèi)容物收縮時落入瓶子。同樣，第一次打開瓶子時，空氣會迅速地進入瓶子，這會引起污染。因此，在滅菌過程中被打開的瓶子，應(yīng)使其在無菌環(huán)境中冷卻至室溫，例如在擰蓋之前將其保持在消毒鍋內(nèi)或放在層流罩內(nèi)。